文献类型：期刊文章

作　　者：彭晨阳[1] 任安琦[1] 李婉蓉[1] 武福云[1] 陈义芝[1]

PENG Chenyang;REN An-qi;LI Wan-rong;WU Fu-yun;CHEN Yi-zhi(Department of Pathophysiology,College of Basic Medicine,Hubei University of Medicine,Shiyan,Hubei 442000,China)

机构地区：[1]湖北医药学院基础医学院病理生理学教研室,湖北十堰442000

出　　处：《湖北医药学院学报》

基　　金：湖北医药学院研究生启动金项目(2020QDJZR026);大学生创新创业训练计划项目(S202110929009)。

年　　份：2023

卷　　号：42

期　　号：1

起止页码：11-14

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：目的:NPM1基因突变导致多种类型的血液肿瘤,其中最常见的是NPM1突变导致急性髓系白血病(AML)及间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)。构建这两种最常见的NPM1突变基因真核表达载体并分析其表达情况,对于研究NPM1突变与血液肿瘤发生的关系具有重要意义。方法:设计NPM1突变基因引物,通过重叠PCR扩增基因片段,并插入到pEGFP-N1载体,构建GFP-NPMc+及GFP-NPM-ALK真核表达载体;转染GFP-NPM1突变载体到HEK293T细胞,荧光显微镜观察突变蛋白细胞定位情况;免疫印迹检测NPM1突变蛋白过表达对相关细胞信号通路的影响。结果:双酶切实验显示GFP-NPMc+和GFP-NPM-ALK真核表达载体构建成功;荧光显微镜观察显示NPMc+和NPM-ALK突变蛋白均主要定位于细胞质;免疫印迹结果显示NPM1突变能够激活PKC和ERK等信号通路。结论:成功构建了血液肿瘤中最常见的NPM1突变基因表达载体,并通过NPM1蛋白细胞定位的分析,我们认为NPM1突变蛋白共有的组成结构域NPM-N端可能在各种血液肿瘤发生中发挥重要作用。

关 键 词：NPM1 血液肿瘤 载体构建  蛋白表达

分 类 号：R733] Q78[临床医学类]