文献类型：期刊文章

作　　者：彭日荷[1] 郭美锦[2] 等[3] 李贤[3] 范惠琴[3] 张嗣良[3] 姚泉洪[4]

彭日荷[1];郭美锦[2];等[3];李贤[3];范惠琴[3];张嗣良[3];姚泉洪[4];

机构地区：[1]上海市农业科学院 [2]华东理工大学生物工程学院 [3] [4]上海市农业科学院生物技术研究所

出　　处：《生物化学与生物物理学报：英文版》

年　　份：2002

卷　　号：34

期　　号：6

起止页码：725-730

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD（2011-2012）、JST、PUBMED、RSC、SCIE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：自然界很难获得大量的耐高温植酸酶，采取连续延伸PCR方法，按照毕氏酵母的偏爱密码，合成1.3kb烟熏曲霉耐高温植酸酶基因fphy。合成基因与野生型基因核苷酸序列同源性为74％，但编码的氨基酸序列一致，将耐高温植酸酶基因fphy插入毕氏酵母高效表达载体pPIC9中，与9分泌信号肽序列融合，通过同源重组将耐高温植酸基因整合到酵母染色体中，通过SDS－PAGE检测的和表达产物的酶活性筛选，得到重组转化子，证明植酸酶获得有效分泌和高效表达，经过5L小罐高密度发酵，蛋白质表达量为5．6g/L，每毫升发酵液中植酸酶的活力单位达130000u；表达产物高温性很强，90℃处理80min后仍有40％的活性。

关 键 词：毕氏酵母 高效表达  耐高温植酸酶 热稳定植酸酶  基因合成

分 类 号：TQ925] Q78