文献类型：期刊文章

作　　者：李吻吻[1] 朱智鑫[1] 韩利民[1] 焦艳林[1] 翁宗琴[1] 赵海龙[1]

LI Wenwen;ZHU Zhixin;HAN Limin;JIAO Yanlin;WENG Zongqin;ZHAO Hailong(Department of Pathophysiology,School of Preclinical Medicine,Zunyi Medical University,Zunyi 563000,China)

机构地区：[1]遵义医科大学基础医学院病理生理学教研室,563000

出　　处：《天津医药》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(82060503);贵州省科技计划项目(黔科合基础[2019]1334号);贵州省卫健委科学技术基金资助项目(gzwjkj2019-1-033)。

年　　份：2022

卷　　号：50

期　　号：11

起止页码：1121-1127

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、IC、JST、PUBMED、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨miR-101-3p靶向E2F转录因子2(E2F2)调控黑色素瘤细胞增殖的作用机制。方法使用GEPIA、OSskcm等数据库联合分析E2F2在黑色素瘤中的表达,并评估转录因子E2F2在黑色素瘤预后中的价值;利用短发夹RNA(shRNA)抑制黑色素瘤细胞MV3中E2F2表达后,分别采用PI染色和流式细胞术检测细胞周期的改变;Western blot实验检测细胞周期蛋白E(CyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的表达水平;免疫荧光实验检测细胞中自噬相关蛋白LC3B的表达水平;裸鼠荷瘤实验观察黑色素瘤在体内生长的变化。经miR-101-3p mimics处理后,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测MV3细胞中miR-101-3p的表达水平,同时利用qPCR和Western blot实验检测E2F2的表达水平;通过MTT、BrdU法检测MV3细胞增殖水平。结果E2F2表达升高的患者预后更差(P<0.05);与shGFP组相比,shE2F2组中处于G0/G1期的细胞比例显著增多(P<0.05),CyclinE和CDK2的表达水平显著降低,自噬相关蛋白LC3B荧光信号明显减少(P<0.05),体内黑色素瘤形成质量显著降低(P<0.05);采用miR-101-3p mimics处理后,MV3细胞中miR-101-3p的表达水平明显升高(P<0.05),E2F2的mRNA和蛋白表达均显著低于NC mimics处理组(P<0.05),同时MTT结果表明miR-101-3p mimics组MV3细胞的活力显著降低(P<0.05),BrdU标记试验结果显示miR-101-3p mimics组细胞中BrdU阳性信号明显减少(P<0.05)。结论miR-101-3p可靶向E2F2并抑制其表达,进而降低黑色素瘤细胞增殖水平。

关 键 词：黑色素瘤 E2F2转录因子  细胞增殖 miR-101-3p  

分 类 号：R739.5]