文献类型：期刊文章

作　　者：刘云[1] 朱琳琦[1] 邵世和[1]

LIU Yun;ZHU Linqi;SHAO Shihe(Department of Microbiology and Laboratory Research,Institute of Clinical Laboratory Medicine,School of Medical Sciences,Jiangsu University,Zhenjiang 212013,China)

机构地区：[1]江苏大学医学院检验医学研究所微生物学及检验教研室,江苏镇江212013

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81772157);江苏省教育厅江苏省研究生科研创新计划项目(KYCX20_3049)。

年　　份：2022

卷　　号：48

期　　号：6

起止页码：1498-1509

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨环状RNA hsa_circ_0009735在胃癌组织和细胞中的表达,阐明其对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)、迁移、细胞周期和自噬的影响。方法:取正常胃黏膜GES-1细胞、胃癌MGC-803细胞、MKN-45细胞和HGC-27细胞。将hsa_circ_0009735小干扰RNA和阴性对照转染MGC-803细胞,将胃癌MGC-803细胞分为si-hsa_circ_0009735组和阴性对照组;将对照质粒和hsa_circ_0009735过表达质粒转染入HGC-27细胞,将胃癌HGC-27细胞分为OE-hsa_circ_0009735组和对照质粒组;MGC-803细胞转染细胞自噬质粒pcDNA-eGFP-LC3后分为空白组和不同浓度(0.25、0.50、1.00和2.00 mg·L^(-1))雷帕霉素组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测胃癌组织和细胞中hsa_circ_0009735表达水平,激光共聚焦显微镜观察各组MGC-803细胞形态表现和细胞中自噬小体数,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数,流式细胞术检测不同细胞周期各组细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、E-钙黏蛋白、Cyclin D1、Vimentin和N-钙黏蛋白表达水平。结果:PCR产物经测序发现存在环化位点,与hsa_circ_0009735序列匹配。与癌旁组织比较,胃癌组织中hsa_circ_0009735表达水平升高(P<0.05);与GES-1细胞比较,MGC-803细胞中hsa_circ_0009735表达水平升高(P<0.05)。与空白组比较,0.25和0.50 mg·L^(-1)雷帕霉素组MGC-803细胞形态无明显改变,1.00 mg·L^(-1)雷帕霉素组MGC-803细胞中颗粒增多,边界不清;2.00 mg·L^(-1)雷帕霉素组死亡MGC-803细胞较多。激光共聚焦显微镜下1.00 mg·L^(-1)雷帕霉素组MGC-803细胞中自噬小体数与2.00 mg·L^(-1)雷帕霉素组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,不同浓度雷帕霉素组MGC-803细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高(P<0.05),hsa_circ_0009735表达水平降低(P<0.01)。与阴性对照组比较,si-hsa_circ_0009735组MGC-803细胞中hsa_circ_0009735表达水平降低(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值�

关 键 词：hsa_circ_0009735  胃肿瘤  上皮间质转化 迁移  细胞周期 自噬

分 类 号：R735.2] R34[临床医学类]