文献类型：期刊文章

作　　者：马靖雯[1,3] 王艳萍[2] 王敏[3] 黄天兰[1,3] 施添凤[1,3] 余苗[1,3] 司军强[1] 李丽[3]

MA Jing-wen;WANG Yan-ping;WANG Min;HUANG Tian-lan;SHI Tian-feng;YU Miao;SI Jun-qiang;LI Li(Department of Physiology,Shihezi University College Xinjiang,Shihezi 832002;Department of Nursing,Medical College,Jiaxing University,Jiaxing 314000,China;Jiaxing Medical College,Jiaxing 314000,China)

机构地区：[1]石河子大学医学院生理学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,石河子832000 [2]嘉兴学院医学院护理系,嘉兴314000 [3]嘉兴学院医学院基础医学部,嘉兴314000

出　　处：《中国应用生理学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81960188);浙江省自然科学基金探索项目(LY21H130001)。

年　　份：2022

卷　　号：38

期　　号：4

起止页码：348-355

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探究顺铂(CDDP)诱导C57BL/6J小鼠耳蜗螺旋神经元(SGNs)凋亡过程中Cav1.2的作用及其可能的机制。方法:动物实验:选取8周龄雄性C57BL/6J小鼠分为以下两组(10只/组):生理盐水组(Control组)和顺铂给药组(Cisplatin组)。Control组每天腹腔注射生理盐水,Cisplatin组每周期前4 d以3 mg/kg的剂量进行顺铂腹腔注射,后10 d每日注射生理盐水,重复三个周期。给药结束后,听性脑干反应(ABR)检测小鼠听力阈值变化;小鼠内眦采血,并断颈取耳蜗,超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)试剂盒检测血清及耳蜗组织的SOD活性和MDA含量;免疫印迹法(Western blot)检测耳蜗组织相关凋亡蛋白表达;苏木精-伊红HE染色观察小鼠耳蜗螺旋神经节形态学变化;TUNEL染色观察小鼠耳蜗SGNs凋亡情况;免疫荧光观察耳蜗SGNs上Cav1.2的分布和表达。细胞实验:原代培养SGNs,根据CCK8选择顺铂5μmol/L干预12 h并随机分为:对照组(Control)、溶剂组(DMSO)、Cav1.2阻断剂组(N)、顺铂组(Cisplatin)、顺铂与Cav1.2阻断剂共同孵育组(Cisplatin+N)。Western blot检测Cav1.2蛋白表达;Hoechst33342染色观察各组SGNs凋亡情况,流式细胞术检测各组SGNs凋亡率,Western blot检测相关凋亡蛋白的表达,CA探针检测细胞内钙离子浓度变化,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测膜电位变化,线粒体超氧化物指示剂(MitoSOX-red)检测线粒体释放ROS情况。结果:动物实验:与Control组相比,Cisplatin组小鼠听力阈值升高(P<0.01),血清及耳蜗组织MDA含量、耳蜗组织凋亡蛋白Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平和TUNEL阳性率、Cav1.2蛋白表达水平等均明显升高(P<0.05,P<0.01);血清及耳蜗组织SOD活性、耳蜗组织抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白水平和SGCs密度均明显降低(P<0.05,P<0.01)。细胞实验:与Control组相比,Cisplatin组的Cav1.2表达、细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白水平、细胞内钙离子浓度以及ROS释放均明显增加(P<0.05,P<0.01);�

关 键 词：顺铂 Cav1.2  小鼠 细胞培养 耳蜗螺旋神经节神经元  凋亡

分 类 号：R339.16]