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期刊文章详细信息

利用CRISPR/Cas9系统定向编辑黑腹果蝇Osiris24基因    

CRISPR/Cas9 Targeted Editing of Osiris24 in Drosophlia melanogaster

  

文献类型:期刊文章

作  者:董玮[1] 宋晨阳[1] 张婷婷[1] 武丽仙[2] 张徐波[1]

DONG Wei;SONG Chen-Yang;ZHANG Ting-Ting;WU Li-Xian;ZHANG Xu-Bo(Institute of Applied Biology,Shanxi University,Taiyuan 030006,China;Institute of Zoology,Guangdong Academy of Sciences,Guangzhou 510260,China)

机构地区:[1]山西大学应用生物学研究所,太原030032 [2]广东省科学院动物研究所,广州510260

出  处:《中国生物化学与分子生物学报》

基  金:国家自然科学基金项目(No.32170505,32170526);山西省自然科学基金(No.20210302123473);山西省回国留学人员项目(No.HGKY2019011)资助。

年  份:2022

卷  号:38

期  号:9

起止页码:1252-1258

语  种:中文

收录情况:AJ、BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘  要:Osiris基因在几丁质沉积过程中表达,可能参与昆虫表皮的发育。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对Osiris24基因进行编辑,进而观察Osiris24突变体果蝇的性状并且检测Osiris24的表达特征。在Osiris24第1外显子设计2个sgRNA靶位点,插入到pCFD4敲除载体骨架中,同时构建酵母Gal4蛋白序列的供体(donor)载体,将2个载体同时注射到nos-Cas9胚胎中获得G0代转基因果蝇。结果显示,G0代基因编辑阳性率为92.8%,Osiris24纯合突变体在胚胎或1龄幼虫期致死,杂合突变体未观察到可见表型。将阳性G0代雄虫与UAS-GFP雌虫杂交,检测不同龄期和不同组织GFP信号表达情况。结果发现,Osiris24在不同龄期幼虫中均有表达,幼虫期主要在体壁、气管、前肠和后肠高表达,蛹期主要在体壁和翅上表达,推测其在果蝇发育中发挥重要作用,本研究为深入探究Osiris基因功能提供了研究模型。

关 键 词:果蝇 Osiris24  CRISPR/Cas9  基因编辑  表皮

分 类 号:Q35]

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