文献类型：期刊文章

作　　者：杨仕赛[1,2] 赵瑄[2] 王雨虹[2] 郑红梅[2] 甘婷[2] 朱贵明[2]

YANG Shisai;ZHAO Xuan;WANG Yuhong;ZHENG Hongmei;GAN Ting;ZHU Guiming(School of Basic Medicine,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou,China;Key Laboratory of Biological and Medical Engineering,School of Biology and Engineering,Guizhou Medical University,Guiyang 550025,Guizhou,China)

机构地区：[1]贵州医科大学基础医学院,贵州贵阳550025 [2]贵州医科大学生物与工程学院生物与医学工程重点实验室,贵州贵阳550025

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家自然科学基金(31960205);贵州省教育厅创新群体重大研究项目(黔教合KY字[2016]031)。

年　　份：2022

卷　　号：38

期　　号：8

起止页码：2912-2927

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：极长链多不饱和脂肪酸(very long chain polyunsaturated fatty acids,VLC-PUFAs)是哺乳动物视网膜、睾丸等极少数组织中特有的脂肪酸,其生物合成的关键酶为极长链脂肪酸延长酶4(very long chain fatty acid elongase 4,Elovl4)。建立组织特异性敲除Elovl4基因的动物模型有利于深入研究VLC-PUFAs的生物学功能,因此,本研究基于Cre/loxP系统,先分别构建了Stra8-Cre小鼠和Elovl4 floxed小鼠,通过杂交获得(Elovl4[flox/+],Stra8-Cre)杂合子基因敲除小鼠,再选择雌鼠与Elovl4 floxed纯合子雄鼠即Elovl4[flox/flox]雄鼠杂交,通过基因型鉴定筛选获得(Elovl4[flox/flox],Stra8-Cre)纯合子小鼠。利用RT-PCR、qRT-PCR、Western blotting、免疫组化和免疫荧光检测Elovl4在睾丸组织中的敲除效率,结果表明,无论是杂合子还是纯合子基因敲除小鼠,其睾丸组织中Elovl4的表达在mRNA及蛋白水平显著下调,但其他组织未受影响。本研究成功构建了睾丸组织特异性敲除Elovl4基因小鼠,为后续研究VLC-PUFAs对雄性小鼠生殖功能的影响及相关分子机制提供可靠的动物模型。

关 键 词：Cre/loxP  睾丸 Elovl4  Stra8-Cre  特异性敲除  

分 类 号：Q78]