文献类型：期刊文章

作　　者：张雨薇[1,2] 彭言峰[1] 刘双军[1] 陈子杨[1] 韩德明[2] 李景良[1] 常军亮[1]

Zhang Yuweil;Peng Yanfeng;Liu Shuangjun;Chen Ziyang;Han Deming;Li Jingliang;Chang Junliang(Biotechnology Laboratory,Changchun Institute of Biological Products Co.,Ltd.,Changchun 130012,China;Department of Bioengineering,School of Life Science and Technology,Changchun Universityof ScienceandTechnology,Changchun130022,China)

机构地区：[1]长春生物制品研究所有限责任公司生物技术研究室,长春130012 [2]长春理工大学生命科学技术学院生物工程系,长春130022

出　　处：《国际生物制品学杂志》

基　　金：吉林省省级医药健康产业发展专项基金项目(2017-0311010YY)。

年　　份：2022

卷　　号：45

期　　号：4

起止页码：181-186

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：目的制备抗汉城病毒(Seoul virus,SEOV)荧光单克隆抗体(单抗),并初步应用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液的病毒灭活验证。方法以SEOV L-99株灭活病毒原液为免疫原,采用小鼠杂交瘤细胞融合技术,筛选抗SEOV特异性单抗杂交瘤;小鼠体内诱生法制备单抗腹水,蛋白A亲和层析纯化单抗,并以蛋白质印迹法鉴定其特异性;间接ELISA测定单抗效价和相对亲和力;纯化单抗采用搅拌法标记异硫氰酸荧光素,并分别采用直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法对Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液进行病毒灭活验证。结果共筛选出4株特异性抗SEOV L-99株杂交瘤1D5、2E3、3A4及5B7。蛋白质印迹法鉴定4株单抗均与SEOV L-99株核衣壳蛋白发生特异性反应;间接ELISA测定腹水效价为3.13×10^(-8)~1.25×10^(-7);相对亲和力顺序为1D5>3A4>2E3>5B7;纯化抗体纯度>95%;异硫氰酸荧光素标记1D5株单抗的结合比率为3.4;直接免疫荧光法与小鼠脑内接种法检测盲传3代的Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗原液,病毒灭活验证结果一致。结论成功筛选到高效价特异性抗SEOV单抗,并制备成荧光单抗,可用于Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗生产工艺中的病毒灭活验证。

关 键 词：肾综合征出血热 汉城病毒  荧光单克隆抗体  灭活验证  

分 类 号：R392-33]