文献类型：期刊文章

作　　者：林芮[1] 骈雅婧[1] 张朝钦[1] 周丽[1] 任香梅[1]

Lin Rui;Pian Yajing;Zhang Chaoqin;Zhou Li;Ren Xiangmei(Department of Nutrition,School of Public Health,Xuzhou Medical University,Xuzhou 221004,China)

机构地区：[1]徐州医科大学公共卫生学院营养学教研室,徐州221004

出　　处：《卫生研究》

基　　金：国家自然科学基金(No.81302429);江苏省研究生科研与实践创新计划项目(No.KYCX20_2500,KYCX21_2726)。

年　　份：2022

卷　　号：51

期　　号：4

起止页码：632-637

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)基于蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)通路对镉诱导小鼠睾丸间质细胞凋亡的调控机制。方法将小鼠睾丸间质细胞(TM3)分为对照组、镉染毒组(Cd,5、10、20、30、40和50μmol/L)、NAC组(NAC,500μmol/L)及NAC+镉染毒组(500μmol/L NAC+20μmol/L Cd),其中NAC+Cd染毒组先用NAC预处理30 min,再联合镉染毒24 h。CCK8测定细胞存活率,Hoechst染色检测细胞形态,流式细胞仪分析细胞凋亡率,同时测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量,Western blot免疫印迹法分别检测AKT蛋白、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达水平。结果镉可抑制TM3细胞增殖且存在剂量-效应关系。细胞形态观察发现,随着镉染毒浓度的增加,细胞缩小变圆甚至脱落,核致密浓染;NAC预处理可明显改善镉对TM3细胞的损伤,浓染细胞明显减少。镉染毒组的MDA含量为(1.56±0.11)μmol/mg prot,较对照组显著升高(P<0.01),GSH水平为(1.28±0.25)μmol/mg prot,明显低于对照组(P<0.01);NAC预处理可降低细胞内MDA含量,提高GSH水平,与镉染毒组相比,差异有统计学意义(P<0.01);Western blot结果显示,NAC+Cd组磷酸化AKT蛋白和Bcl-2蛋白表达水平分别为0.65±0.05和0.45±0.03,均显著高于Cd染毒组(P<0.01),并且Bax/Bcl-2比值为1.54±0.15,较镉染毒组显著降低(P<0.01)。结论NAC可抑制镉诱导的TM3细胞损伤及其凋亡,可能与NAC改善细胞氧化应激状态,激活TM3细胞AKT通路和降低Bax/Bcl-2比值有关。

关 键 词：N-乙酰半胱氨酸 镉 睾丸间质细胞 细胞凋亡 蛋白激酶B通路  

分 类 号：R114]