文献类型：期刊文章

作　　者：黄海宁[1,2] 汪汇[4] 龙超良[2] 张浩[2,4] 汪海[2,3,4]

HUANG Hai-ning;WANG Hui;LONG Chao-liang;ZHANG Hao;WANG Hai(Affiliated Hospital of Jining Medical University,Jining 272029;Thadweik Academy of Medicine,Beijing 100039;College of Heacth Science,Jiangsu Normal University,Xuzhou 221116;General Hospital of PLA,Beijing 100853,China)

机构地区：[1]济宁医学院附属医院,山东济宁272029 [2]北京赛德维康医药研究院,北京100039 [3]江苏师范大学健康科学学院,徐州221116 [4]中国人民解放军总医院,北京100853

出　　处：《中国应用生理学杂志》

基　　金：国家973计划项目子课题(2011CB518206);济宁医学院教师科研扶持基金(JYFC2019FKJ161)。

年　　份：2022

卷　　号：38

期　　号：2

起止页码：169-174

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EMBASE、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨Cereblon(CRBN)对沙利度胺抑制人肺癌A549细胞及人肝癌HepG2细胞分泌VEGF/bFGF的影响。方法:采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立稳定敲低CRBN的A549细胞系(A549_(CRBN))及HepG2细胞系(HepG2_(CRBN))并通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白质印记(Western blot)实验验证。将A549细胞分为阴性对照组(A549_(luciferase))、CRBN低表达组(A549_(CRBN));HepG2细胞分为阴性对照组(HepG2_(luciferase))、CRBN低表达组(HepG2_(CRBN)),以上细胞按照3×10^(5)cells/well接种到6孔板中,放入37℃,5%CO_(2)的培养箱中培养24 h,分别加入1 ml含100μmol/L沙利度胺(thalidomide组)和1 ml 1‰DMSO(control组)的培养液,继续培养24 h再行后续实验,每组设计3个复孔。MTS法检测沙利度胺对细胞增殖的影响;Real-time PCR检测VEGF、bFGF、c-jun mRNA表达,ELISA法检测VEGF、bFGF蛋白表达。结果:与对照组比较,沙利度胺在浓度为1、10、50、100μmol/L时对A549及HepG2细胞的增殖能力无显著影响(P>0.05)。与A549_(CRBN)或HepG2_(CRBN)组比较,A549_(luciferase)及HepG2_(luciferase)组分泌的VEGF及bFGF均显著降低(P<0.05)。与A549_(luciferase)或HepG2_(luciferase)细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制A549_(luciferase)和HepG2_(luciferase)细胞的VEGF和bFGF的表达(P<0.05),而对A549_(CRBN)和HepG2_(CRBN)细胞中VEGF和bFGF的表达无显著抑制作用;与HepG2_(luciferase)细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制HepG2_(luciferase)细胞的c-Jun表达(P<0.01),而对HepG2_(CRBN)细胞的c-Jun表达无显著抑制作用。结论:沙利度胺对A549和HepG2细胞VEGF和bFGF表达的抑制作用可能是通过CRBN介导的,而c-Jun可能是抑制作用的关键转录因子之一。

关 键 词：沙利度胺 血管新生  细胞培养  血管内皮生长因子(VEGF)  碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)  cereblon(CRBN)  

分 类 号：R966]