文献类型：期刊文章

作　　者：唐伟博[1] 刘丽[2] 申景岭[2,3]

TANG Wei-bo;LIU Li;SHEN Jing-ling(Laboratory of Targeted Therapy and Translational Medicine,Jilin Medicine University,Jilin Jilin 132000,China;College of Life and Environmental Sciences,Wenzhou University,Zhejiang Wenzhou 325035,China;Department of Histology and Embryology,Harbin Medical University,Harbin 150081,China)

机构地区：[1]吉林医药学院肿瘤靶向治疗与转化医学实验室,吉林吉林132000 [2]温州大学生命与环境科学学院生命科学研究院,浙江温州325035 [3]哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室,哈尔滨150081

出　　处：《解剖学报》

基　　金：黑龙江省留学归国人员科学基金(LC2017013)。

年　　份：2022

卷　　号：53

期　　号：4

起止页码：440-446

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的利用HB9启动子构建小鼠脊髓运动神经元特异表达人类TAR DNA/RNA结合蛋白43(hTDP-43)突变转基因小鼠,建立肌萎缩侧索硬化症(ALS)疾病模型,探究hTDP-43突变导致ALS发生的机制。方法体外构建HB9启动子连接突变hTDP-43载体,通过原核注射制备并筛选阳性转基因小鼠品系(Q331K位点和M337V位点突变各8~10只)。通过步态分析、转棒疲劳仪实验和悬挂实验检测小鼠运动能力;通过免疫组织化学法、免疫荧光染色和Western blotting分别检测hTDP-43、磷酸化hTDP-43(p-hTDP-43),Caspase-3、剪切Caspase-3(cleaved Caspase-3)、泛素蛋白、β-微管蛋白Ⅲ(Tuj1)、Ki67和细胞周期依赖性激酶5(CDK5)蛋白的表达情况。结果脊髓运动神经元表达突变hTDP-43蛋白的转基因小鼠双后肢向躯干侧回缩,运动机能随月龄增加呈现进程性减退。转基因小鼠脊髓运动神经元可见hTDP-43,p-hTDP43,Caspase-3,cleaved Caspase-3阳性染色和泛素蛋白阳性包涵体,体外分离培养脊髓胸腰段运动神经元发现hTDP-43和泛素蛋白共定位于胆碱乙酰基转位酶(ChAT)阳性的运动神经元,并伴随CDK5异位表达。结论小鼠脊髓运动神经元表达突变的hTDP-43蛋白,可促使分化的成熟神经元重新进入细胞周期,导致ALS发生。

关 键 词：TAR DNA/RNA结合蛋白43  肌萎缩侧索硬化症 细胞周期依赖性激酶5  神经退行性疾病  脊髓运动神经元 免疫印迹法  小鼠

分 类 号：R394.1]