期刊文章详细信息
低氧培养环境对脐带间充质干细胞增殖及生物学特性的影响
Effects of hypoxia on proliferation and biological characteristics of human umbilical cord mesenchymal stem cells
文献类型:期刊文章
ZHANG Li;YANG Junye;FANG Jingchao;ZHANG Hua;XU Zhiguo;HAN Junling;ZHANG Yu;DU Wei(Union Stem Cell&Gene Engineering Co.,Ltd.,Tianjin 300384,China;Tianjin Enterprises Key Laboratory of Blood Cell Therapy Technology,Tianjin 300384,China;National Stem Cell Product Industrialization Base,Tianjin 300384,China;Huzhou College,Huzhou 313000,China;Eastern Union Stem Cell&Gene Engineering Co.,Ltd.,Huzhou 313000,China;School of Medicine,Nankai University,Tianjin 300071,China)
机构地区:[1]协和干细胞基因工程有限公司,天津300384 [2]天津市血液细胞治疗技术企业重点实验室,天津300384 [3]国家干细胞产品产业化基地,天津300384 [4]湖州师范学院求真学院生命科学与健康系,浙江湖州313000 [5]协和华东干细胞基因工程有限公司,浙江湖州313000 [6]南开大学医学院,天津300371
基 金:天津市科技计划创新平台专项(18PTSYJC00070);天津市博士后择优资助计划项目(TJQYBSH2018030)。
年 份:2022
卷 号:45
期 号:5
起止页码:886-894
语 种:中文
收录情况:CAB、CAS、IC、RCCSE、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的 研究低氧环境对人脐带间充质干细胞(h UCMSCs)增殖及生物学特性的影响。方法 分别在5%O;和21%O_(2)环境下培养h UCMSCs,使用群体倍增时间(PDT)评价h UCMSCs的增殖情况;流式细胞术检测细胞表面标志CD73、CD90、CD105、CD34、CD45、HLA-DR的表达;培养基诱导分化后,茜素红-S对含钙骨细胞染色检测成骨诱导分化,油红O对脂滴染色检测成脂诱导分化,阿尔新蓝8GX对蛋白多糖检测软骨诱导分化;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色法检测h UCMSCs对植物血凝素P(PHA-P)刺激的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的增殖抑制作用,并应用流式细胞术检测对CD8^(+)T细胞的抑制作用;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、胰岛素样生长因子2(IGF-2)、转化生长因子β(TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、基质细胞衍生生长因子1(SDF-1)、神经生长因子(NGF)m RNA表达;试剂盒法检测细胞培养上清中IGF-2浓度。结果 21%O_(2)和5%O_(2)环境培养的h UCMSCs表面标志CD73、CD90、CD105的表达均为阳性(>95%),CD34、CD45、HLA-DR的表达均为阴性(<2%),均具有成骨、成脂、成软骨三系分化的能力;5%O_(2)组的PDT均显著小于21%O_(2)组(P<0.05);PBMC经PHA-P刺激后观察到细胞增殖聚集,与h UCMSCs共培养后几乎没有聚集出现,与PBMC+PHA-P组比较,PBMC+PHA-P+h UCMSCs(21%或5%O;)组子代细胞明显减少,PBMC+PHA-P+h UCMSCs(5%O_(2))组PBMC抑制率为(61.44±0.92)%,与PBMC+PHA-P+h UCMSCs(21%O_(2))抑制率(60.48±4.00)%相当,无统计学差异,且两组h UCMSCs对CD8^(+)T细胞的抑制作用无统计学差异。与21%O_(2)组比较,5%O_(2)组h UCMSCs HIF-1α、IGF-2、SDF-1、HGF、VEGF、b FGF、NGF m RNA表达水平显著升高(P<0.05、0.001),TGF-β无明显变化;5%O_(2)组h UCMSCs培养上清IGF-2水平显著高于21%O_(2)组(P<0.001)。结论 5%O;环境可使h UCMSCs的
关 键 词:脐带间充质干细胞 低氧 增殖 生长因子
分 类 号:R329.2]
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