文献类型：期刊文章

作　　者：黄庆洋[1] 纪东东[1] 田绣云[1] 马琳艳[2] 孙小锦[2]

HUANG Qingyang;JI Dongdong;TIAN Xiuyun;MA Linyan;SUN Xiaojin(Department of Clinical Medicine,Bengbu Medical College,Biochemical Drugs Engineering and Technological Research Center of Anhui Province,Bengbu 233030,China;Department of Pharmacy,Bengbu Medical College,Biochemical Drugs Engineering and Technological Research Center of Anhui Province,Bengbu 233030,China)

机构地区：[1]蚌埠医学院临床医学院,安徽蚌埠233030 [2]蚌埠医学院药学院,安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233030

出　　处：《南方医科大学学报》

基　　金：蚌埠医学院自然科学基金(BYKY1641);蚌埠医学院自然科学基金(BYKY1806ZD,2020byzd016)。

年　　份：2022

卷　　号：42

期　　号：6

起止页码：937-943

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨小檗碱对于Erastin诱导小鼠海马神经元HT22细胞的铁死亡的保护作用及其可能机制。方法以HT22小鼠海马神经元细胞为研究对象,分为对照组、Erastin模型组、Erastin+30μmol/L BBR组、Erastin+60μmol/L BBR组。采用CCK-8法、特异性Fe2+荧光探针、荧光染料(DAPI)检测和荧光探针(H2DCFH-DA)检测各实验组细胞的增殖情况、活性铁水平、细胞凋亡和活性氧(ROS)变化。RT-qPCR和Western blot分别检测各实验组细胞的Nrf2、HO-1、GPX4 mRNA和蛋白表达情况。以60μmol BBR的最适浓度来进一步探究其作用机制,分为对照组、Erastin模型组、Erastin+60μmol/L BBR组、Erastin+60μmol/L BBR+2μmol Nrf2抑制剂ML385组。通过使用荧光探针和Western blot检测Nrf2抑制剂(ML385)作用后的活性铁的水平、活性氧含量以及Nrf2、HO-1、GPX4蛋白的表达来验证小檗碱调节的Nrf2-HO-1/GPX4通路对Erastin处理的HT22细胞的保护作用。结果0.5μmol/L Erastin作用于HT22细胞8 h,细胞存活率与对照组相比显著被抑制(P<0.05);同时细胞凋亡、ROS以及活性铁含量增加(P<0.05)。与Erastin组比较,Erastin+30μmol/L BBR组和Erastin+60μmol/L BBR组的细胞存活率明显升高(P<0.05),同时显著降低细胞凋亡、ROS以及活性铁含量(P<0.05)。小檗碱增加HT22细胞中Nrf2、HO-1、GPX4基因及蛋白的表达量(P<0.05)。加入Nrf2抑制剂ML385后,Nrf2-HO-1/GPX4通路被抑制,并且ROS以及活性铁含量升高(P<0.05)。结论Erastin诱导HT22细胞发生铁死亡,小檗碱抑制Erastin诱导的铁死亡,可能机制是激活了Nrf2-HO-1/GPX4通路。

关 键 词：小檗碱 Erastin  HT22细胞  铁死亡  神经保护 Nrf2-HO-1/GPX4  

分 类 号：R285.5[中药学类]