文献类型：期刊文章

作　　者：蔡欣[1] 周婷婷[2] 朱进[2] 孙学伟[3] 刘晓光[4] 杨展[2] 汪茂荣[1]

CAI Xin;ZHOU Ting-ting;ZHU Jin;SUN Xue-wei;LIU Xiao-guang;YANG Zhan;WANG Mao-rong(Department of Hepatology,Qinhuai Medical District,General Hospital of Eastern Theater Command,PLA/Bayi Clinical College,Anhui Medical University,Nanjing 210002,Jiangsu,China;Center for Disease Control and Prevention,Eastern Theater,Nanjing 210001,Jiangsu,China;School of Basic Medical Sciences,Binzhou Medical College,Yantai 264003,Shandong,China;Department of Respiratory and Critical Care Medicine,Jinling Hospital,Southern Medical University,General Hospital of Eastern Theater Command,PLA,Nanjing 210002,Jiangsu,China)

机构地区：[1]东部战区总医院秦淮医疗区肝病科教研室/安徽医科大学八一临床学院,南京210002 [2]东部战区疾病预防控制中心,南京210001 [3]滨州医学院基础医学院,烟台264003 [4]南方医科大学南京临床医学院(东部战区总医院)呼吸与危重症医学科,南京210002

出　　处：《医学研究生学报》

基　　金：军队后勤科研重大项目(2019SWAQ05-5-4);江苏省社会发展项目(BE2018617)。

年　　份：2022

卷　　号：35

期　　号：5

起止页码：471-477

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)传播迅速,对经济造成威胁。研究快速检测方法,为其检测建立新的方法储备。方法根据严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)基因、刺突蛋白(S)基因及开放阅读区(ORF1ab)基因保守区序列结合逆转录重组酶介导的等温扩增(RT-RAA)和荧光定量、胶体金侧向流免疫层析试纸条(LFD)建立逆转录重组酶介导的等温扩增荧光法(荧光RT-RAA法)和试纸条法(RT-RAA-LFD法)并进行优化,分别以构建的N、S、ORF1ab基因质粒为模板评估这两种方法的灵敏性和重复性;对其他冠状病毒质粒[如HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)、SARS]模板进行检测,验证这两种方法的特异性。结果两种检测方法均可在39℃恒温条件下12 min内完成检测。荧光RT-RAA法中,ORF1ab基因可检测至10^(0)拷贝数,N、S基因可检测至10^(1)拷贝数。RT-RAA-LFD法中,3种基因均可检测至10^(3)拷贝数。两种方法与其他类型的冠状病毒无交叉反应,具有良好的特异性。结论RT-RAA法和LFD法检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于SARS-CoV-2的快速筛查、诊断和监测。

关 键 词：新型冠状病毒肺炎  新型冠状病毒 重组酶介导的等温扩增  快速检测  

分 类 号：R373]