文献类型：期刊文章

作　　者：陈晓[1] 李泽朋[1] 何晓伟[2] 李先伟[1]

CHEN Xiao;LI Ze-peng;HE Xiao-wei;LI Xian-wei(Department of Pharmacology,School of Pharmacy,Wannan Medical College;Anhui Provincial Engineering Laboratory for Screening and Reevaluation of Active Compounds of Herbal Medicines in Southern Anhui,Wuhu 241002,China)

机构地区：[1]皖南医学院药学院药理学教研室 [2]安徽省皖南植物药活性物质筛选与再评价工程实验室,芜湖241002

出　　处：《天然产物研究与开发》

基　　金：安徽省卫生健康委科研重点项目(AHWJ2021a033);安徽省高校自然科学研究重点项目(2018A0254)。

年　　份：2022

卷　　号：34

期　　号：5

起止页码：750-760

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD2021_2022、DOAJ、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：基于细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p27^(Kip1)信号通路探究异钩藤碱(isorhynchophylline,IRN)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)的作用及机制。C57BL/6J小鼠48只,随机正常组、BLM组、BLM+IRN(10、20 mg/kg)两个剂量组,每组12只。气管注射BLM(5000 U/kg)诱导PF小鼠模型,造模后连续灌胃给药21天。HE和Masson染色观察肺组织病理变化及胶原沉积情况。免疫组化检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。体外培养小鼠原代肺成纤维细胞,实验设对照组、转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)(10 ng/mL)组和TGF-β1+IRN(5、10、20μmol/L)三个剂量组。EdU掺入法和流式细胞术检测细胞增殖,Transwell观察细胞的迁移能力。RT-qPCR检测肺组织或肺成纤维细胞TGF-β1、collagen I和α-SMA mRNA的表达。Western blot检测肺组织和(或)肺成纤维细胞TGF-β1、collagen I、α-SMA、p-ERK1/2,p27^(Kip1)、CDK2和Cyclin E1的蛋白水平。动物实验结果显示,与BLM组相比,不同剂量IRN均能明显减轻肺组织结构的损伤、降低炎症细胞的浸润和胶原的沉积;此外,IRN不同程度地降低肺组织TGF-β1、collagen I和α-SMA mRNA和蛋白的表达;同时,IRN还抑制了肺组织ERK1/2的磷酸化、上调p27^(Kip1)和下调CDK2和Cyclin E1的蛋白表达。细胞实验结果显示,与TGF-β1组相比,不同剂量IRN能够明显抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞增殖、显著降低细胞迁移能力;明显降低TGF-β1诱导的collagen I和α-SMA mRNA和蛋白的表达,同时降低ERK1/2的磷酸化水平、上调p27^(Kip1)和下调CDK2和Cyclin E1的蛋白表达。以上结果表明IRN可能通过抑制ERK1/2信号通路、上调p27^(Kip1)的表达而抑制了肺成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,从而减轻了BLM诱导的PF。

关 键 词：异钩藤碱 ERK1/2 p27^(Kip1)  肺纤维化

分 类 号：R965.1]