文献类型：期刊文章

作　　者：雷倩[1] 夏机良[1,2] 冯湘玲[3] 郭姣姣[1] 李官成[1] 周文[1]

LEI Qian;XIA Jiliang;FENG Xiangling;GUO Jiaojiao;LI Guancheng;ZHOU Wen(Cancer Research Institute,School of Basic Medical Science,Central South University,Changsha 410078;Department of Hematology,Xiangya Hospital,Central South University,Changsha 410008;Xiangya School of Public Health,Central South University,Changsha 410078,China)

机构地区：[1]中南大学基础医学院肿瘤研究所,长沙410078 [2]中南大学湘雅医院血液科,长沙410008 [3]中南大学湘雅公共卫生学院,长沙410078

出　　处：《中南大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金(81974010);中南大学中央高校基本科研业务费专项资金(2019zzts717)。

年　　份：2022

卷　　号：47

期　　号：2

起止页码：153-164

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:肝癌是全球第6大常见的恶性肿瘤,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占所有肝癌患者的85%~90%。HCC具有起病隐匿、进展快、复发早、易耐药和预后差的临床特点。中心体相关激酶2(NIMA related kinase 2,NEK2)是细胞周期调控蛋白激酶,在有丝分裂中调节细胞周期。细胞衰老是一个复杂的异质过程,是一种稳定的细胞周期停滞形式,可限制细胞的增殖潜能。本研究旨在分析NEK2表达水平与肝癌细胞衰老的关系,探究NEK2对肝癌细胞衰老的影响及其分子机制。方法:从GenAge获得581个衰老相关基因,从癌症基因组图谱数据库下载370例HCC患者肿瘤组织的基因表达数据,利用R包分析NEK2与衰老相关基因的共表达情况。采用KEGG分析NEK2过表达的HEK293细胞差异基因的富集通路。在肝癌细胞SMMC-7721及HepG2中构建NEK2过表达及敲低的稳定转染细胞株,采用衰老相关的β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞,CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,蛋白质印迹法检测p53/p21、p16/Rb和第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)/Akt信号转导通路相关蛋白质的表达情况。结果:与NEK2共表达的衰老相关基因有320个。KEGG分析显示细胞衰老信号通路在NEK2过表达的HEK293细胞中存在显著富集。与未敲低NEK2的SMMC-7721或HepG2相比,敲低NEK2的SMMC-7721和HepG2衰老细胞增加,细胞增殖和克隆形成明显减少,G0/G1期细胞的百分比增加,磷酸化的Akt(phospho-Akt,p-Akt)和磷酸化的Rb(phospho Rb,p-Rb)蛋白质表达水平明显降低,p16蛋白质表达水平明显升高(均P<0.05);与转染空白质粒的SMMC-7721或HepG2相比,过表达NEK2的SMMC-7721和HepG2衰老细胞减少,细胞增殖和克隆形成明显增加,G0/G1期细胞的百分比减少,p-Akt和p-Rb蛋白质表达水平明显升高,p16蛋白质表达水平明显降低(均P<0.05)。

关 键 词：肝癌 中心体相关激酶2  细胞衰老 细胞增殖 细胞周期

分 类 号：R735.7]