文献类型：期刊文章

作　　者：解园园[1] 牛晓洁[2] 赵雪纯[3] 陆利[1] 杨静[1]

Xie Yuanyuan;Niu Xiaojie;Zhao Xuechun;Lu Li;Yang Jing(Department of Human Anatomy,Shanxi Medical University,Taiyuan 030001;Department of Basic Medicine,Medical College of Datong University,Datong 037000;Fenyang College of Shanxi Medical University,Fenyang 032200,China)

机构地区：[1]山西医科大学基础医学院人体解剖学教研室,太原030001 [2]大同大学医学院基础医学系,大同037000 [3]山西医科大学汾阳学院,汾阳032200

出　　处：《神经解剖学杂志》

基　　金：山西省高等学校教学改革创新项目(J2020094);山西省回国留学人员科研资助项目(2020-085)。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：630-636

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、IC、JST、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:探讨FoxO4是否通过调控自噬影响小鼠神经干细胞(NSCs)的分化能力,寻找调控NSCs分化潜能的有效途径.方法:利用新生BALB/c小鼠提取海马齿状回(DG)NSCs,通过real time RT-PCR和Western Blot实验检测NSCs在分化前后自噬相关基因以及转录因子Forkhead Box O家族(FoxO3、FoxO4和FoxO6)的表达水平;运用基因沉默技术,将电转染后的NSCs分为NC-siRNA组和FoxO4-siRNA组,检测两组NSCs FoxO4 mRNA及蛋白的表达水平,从而验证已转入siRNA序列的目的基因沉默效率;通过real time RT-PCR和Western Blot实验检测NC-siRNA组和FoxO4-siRNA组NSCs自噬相关基因的表达;进一步将两组NSCs分化培养后通过real time RT-PCR实验以及免疫荧光染色检测Tuj1的表达.结果:体外分离培养P0小鼠海马DG区NSCs分化后自噬相关基因ATG3、ATG5、ATG7和Beclin-1 mRNA以及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平被观察到均升高(P<0.01),同时还观察到NSCs分化后FoxO3、FoxO4、FoxO6 mRNA的表达水平均增高(P<0.01),其中转录因子FoxO4的mRNA和蛋白表达增高最为显著(P<0.01).通过运用靶向FoxO4的siRNA转染NSCs后,发现NSCs自噬相关基因ATG3、ATG5、ATG7和Beclin-1 mRNA以及LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平均降低(P<0.05),且NSCs中Tuj1表达受到显著抑制(P<0.05).结论:FoxO4基因沉默降低了小鼠海马NSCs中自噬水平,并抑制其向神经元分化.

关 键 词：叉头框蛋白O4  神经干细胞 自噬 分化能力 小鼠

分 类 号：Q421]