文献类型：期刊文章

作　　者：何云影[1] 张华[2] 季平[1]

HE Yunying;ZHANG Hua;JI Ping(Chongqing Key Laboratoiy of Oral Diseases and Biomedical Sciences,Chongqing Key Laboratory of Oral Biomedical Engineering of Higher Education,College of Stomatology,Chongqing Medical University,Chongqing,400016;Department of Obstetrics and Gynaecology,the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing,400016,China)

机构地区：[1]重庆医科大学口腔医学院,口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室,重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室,重庆400016 [2]重庆医科大学附属第一医院妇产科,重庆400016

出　　处：《陆军军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(82071115)。

年　　份：2022

卷　　号：44

期　　号：4

起止页码：310-319

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)/脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)共培养细胞球内的隧道纳米管(tunneling nanotubes, TNTs)对内皮细胞成血管的影响。方法采用小管形成实验比较MSC/HUVEC成球共培养组、贴壁共培养组、HUVEC三维培养组和MSC三维培养组的血管生成能力,Western blot和免疫荧光染色检测β-catenin蛋白表达量。以微丝解聚试剂(CytoD)处理MSC/HUVEC共培养细胞球,再次检测CytoD处理组和未处理组的上述指标,并采用荧光标记和场发射扫描电镜验证TNTs结构,采用腺病毒感染的方法观察线粒体交流,采用线粒体膜电位检测评估线粒体状态。结果与MSC/HUVEC成球共培养组比较,贴壁共培养组、HUVEC三维培养组和MSC三维培养组的管腔连接交叉点数和小孔数均显著下降(P<0.05)。β-catenin蛋白免疫荧光染色提示,MSC/HUVEC成球共培养组荧光强度强于贴壁共培养组;Western blot检测结果显示MSC/HUVEC成球共培养组细胞内β-catenin表达显著高于贴壁共培养组(P<0.05)。鬼笔环肽染色结果显示,共培养球内MSC和HUVEC间存在TNTs(F-actin)。当成球共培养时,MSC胞内观察到来源于HUVEC的线粒体;HUVEC胞内也观察到来源于MSC的线粒体;而上述线粒体交流在CytoD处理组中均减弱;与未处理组比较,CytoD处理组细胞球的线粒体膜电位显著降低(P<0.05),HUVEC的增殖速度减慢、迁移范围缩小,细胞球的管腔连接交叉点数和小孔数显著下降(P<0.05)。CytoD处理组细胞β-catenin蛋白免疫荧光强度弱于未处理组,β-catenin蛋白表达显著低于未处理组(P<0.05)。结论共培养细胞球内,MSC和HUVEC间存在TNTs及其介导的双向线粒体交流,并可能通过β-catenin相关通路影响细胞球成血管能力。

关 键 词：细胞球 隧道纳米管  线粒体 血管形成 Β-CATENIN

分 类 号：R322.12] R329-33[基础医学类]