文献类型：期刊文章

作　　者：徐少然[1] 夏满莉[2] 邓双[1] 李雪蕊[3] 司军强[1] 李丽[2]

Xu Shaoran;Xia Manli;Deng Shuang;Li Xuerui;Si Junqiang;Li Li(Department of Physiology,Shihezi University,Shihezi 832002,China;Department of Basic Medicine,Jiaxing Medical College,Jiaxing 314000,China;Department of Central Laboratory,the First Affiliated Hospital of Shihezi University,Shihezi 832002,China)

机构地区：[1]石河子大学医学院生理教研室,新疆维吾尔自治区石河子市832002 [2]嘉兴学院医学院基础医学部,浙江省嘉兴市314000 [3]石河子大学第一附属医院中心实验室,新疆维吾尔自治区石河子市832002

出　　处：《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81960188);浙江省自然科学基金探索项目(LY21H130001)。

年　　份：2021

卷　　号：56

期　　号：12

起止页码：1319-1327

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨大电导钙激活钾离子通道[large conductance calcium-activated potassium channel,BK(Ca)]是否参与衰老小鼠耳蜗血管纹毛细血管周细胞(pericytes,PC)的迁移。方法将C57BL/6J小鼠分为3月龄(n=10)组和12月龄组(n=10),听性脑干反应(ABR)检测各组听力阈值;免疫荧光检测各组耳蜗血管纹毛细血管PC上β-BK(Ca)通道和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达变化;透射电镜(transmission electron microscope,TEM)观察各组耳蜗血管纹PC的形态改变。细胞实验:原代培养耳蜗血管纹PC并鉴定;D-半乳糖(D-gal)制备细胞衰老模型,CCK8确定D-gal干预浓度;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色评估细胞衰老水平;全细胞膜片钳技术记录PC上BK(Ca)通道激活电流变化;免疫荧光技术检测PC上β-BK(Ca)通道蛋白表达变化;划痕实验和Transwell实验检测2组细胞迁移侵袭能力;Western blot技术检测β-BK(Ca)通道和OPN蛋白表达水平。采用SPSS 22.0软件对数据进行统计学分析。结果动物实验:12月龄组小鼠较3月龄组ABR阈值升高(t=12.66,P<0.01);12月龄组小鼠耳蜗血管纹PC上β-BK(Ca)通道表达水平较3月龄组降低(t=14.64,P<0.01),OPN表达升高(t=20.73,P<0.01);TEM中3月龄组PC与内皮细胞紧密相连,12月龄组PC与内皮细胞连接疏松或PC胞体从毛细血管壁分离。细胞实验:耳蜗血管纹原代培养的耳蜗血管纹PC阳性率在95%以上,15 mg/ml D-gal干预的PC较对照组的SA-β-gal染色细胞阳性率高,差异有统计学意义(t=36.90,P<0.01)。与对照组PC相比,D-gal干预组全细胞膜片钳BK(Ca)通道电流减小(t=12.18,P<0.05),β-BK(Ca)通道蛋白和荧光表达水平降低(t=11.98,P<0.01;t=15.72,P<0.05),OPN蛋白表达升高(t=18.53,P<0.01),PC迁移能力增加(t=7.91,P<0.01;t=7.59,P<0.01)。D-gal干预后给予BK(Ca)通道特异性阻断剂Iberiotoxin(IBTX)可使OPN表达明显升高(t=4.26,P<0.05),PC迁移能力增加(t=5.88,P<0.01;t=21.97,P<0.01)。结论衰老小鼠耳蜗血管纹毛细血管PC迁移能力增加,β

关 键 词：血管纹 衰老 周细胞 大电导钙激活钾通道 细胞迁移分析  

分 类 号：R764.436]