文献类型：期刊文章

作　　者：黄巧凡[1] 吴昊霖[1] 徐怡倩[1] 樊好飞[1,2] 方星悦[1] 王爱萍[1] 虞道锐[1] 孟庆雯[1] 刘启兵[1,2]

HUANG Qiao-fan;WU Hao-lin;XU Yi-qian;FAN Hao-fei;FANG Xing-yue;WANG Ai-ping;YU Dao-rui;MENG Qing-wen;LIU Qi-bing(Department of Pharmacology,School of Basic Medicine and Life Sciences,Hainan Medical University,Haikou 571199,China;Key Laboratory of Brain Science Research and Transformation in Tropical Environment of Hainan Province,Haikou 571199 China)

机构地区：[1]海南医学院基础医学与生命科学学院药理学教研室,海南海口571199 [2]海南省热带脑科学研究与转化重点实验室,海南海口571199

出　　处：《海南医学院学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81960663);2019年海南医学院大学生创新训练计划项目(X201911810036)。

年　　份：2021

卷　　号：27

期　　号：24

起止页码：1846-1851

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、DOAJ、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:通过葫芦茶苷作用于活性氮致血管内皮细胞损伤模型,探讨其对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法:采用MTT比色法检测葫芦茶苷在5~160μmol/L浓度范围对EA.hy 926内皮细胞存活率的影响;EA.hy 926内皮细胞预给药葫芦茶苷1 h后,给予0.5 mmol/L S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)损伤内皮细胞12 h,通过MTT比色法检测葫芦茶苷对EA.hy 926细胞存活率的影响;Real-time PCR法检测EA.hy 926细胞线粒体特异性因子细胞色素氧化酶1(COX-1)、NADH脱氢酶亚单位1(ND-1)和炎症因子白介素-1β(IL-1β)基因的表达效果,同时采用Western blot法检测Bcl-2关联X蛋白(Bax)和B细胞肿瘤因子2(Bcl-2)经时蛋白表达量的变化;通过线粒体膜电位荧光探针(JC-1)检测葫芦茶苷对EA.hy 926细胞线粒体膜电位的变化规律。结果:MTT法结果表明葫芦茶苷在5~160μmol/L范围内对EA.hy 926细胞无明显细胞毒性且最佳药物保护浓度为40μmol/L。Western Blot法显示GSNO经时损伤EA.hy 926细胞后Bax蛋白表达量呈时间依赖性增高,Bcl-2蛋白表达量与之相反。Real time-PCR结果显示,葫芦茶苷能明显上调COX-1基因(P<0.05),且能明显抑制活性氮GSNO诱导的ND-1(P<0.05)和IL-1β基因上调(P<0.01)。同时JC-1结果显示葫芦茶苷能明显保护线粒体膜电位免受GSNO损伤的作用。结论:活性氮GSNO损伤模型可能通过线粒体DNA损伤诱发Bax等促凋亡蛋白的增加,使抗凋亡因子Bcl-2表达降低。葫芦茶苷对活性氮诱导的内皮细胞线粒体损伤具有一定的保护作用,其机制与抑制ND-1和IL-1β基因表达,上调COX-1基因表达相关。

关 键 词：活性氮 线粒体 葫芦茶苷  内皮细胞

分 类 号：R285[中药学类]