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期刊文章详细信息

活细胞定量FRET成像方法鲁棒性评估  ( EI收录)  

Robustness Evaluation of Quantitative Fluorescence Resonance Energy Transfer Imaging Methods in Live Cells

  

文献类型:期刊文章

作  者:尹傲[1,2] 翟士贤[1,2] 孙晗[1,2] 刘智[1,2] 庄正飞[1,2,3] 陈同生[1,2,3]

Yin Ao;Zhai Shixian;Sun Han;Liu Zhi;Zhuang Zhengfei;Chen Tongsheng(Key Laboratory of Laser Life Science,Ministry of Education,College of Biophotonics,South China Normal University,Guangzhou,Guangdong 510631,China;Guangdong Key Laboratory of Laser Life Science,College of Biophotonics,South China Normal University,Guangzhou,Guangdong 510631,China;SCNU Qingyuan Institute of Science and Technology Innovation Co.,Ltd.,Guangdong 511517,China)

机构地区:[1]华南师范大学生物光子学研究院教育部激光生命科学重点实验室,广东广州510631 [2]华南师范大学生物光子学研究院广东省激光生命科学重点实验室,广东广州510631 [3]师大瑞利光电科技(清远)有限公司,广东清远511517

出  处:《中国激光》

基  金:国家自然科学基金(61875056);国家重大科研仪器研制项目(61527825);广州市科技计划(2019050001)。

年  份:2021

卷  号:48

期  号:21

起止页码:97-110

语  种:中文

收录情况:BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EI、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘  要:基于受体敏化的3-cube(通道)荧光共振能量转移(FRET)成像方法(通常称为E-FRET方法)是活细胞定量FRET检测中主流的成像分析技术。基于激发发射光谱线性分离的定量FRET检测方法(mExEm-spFRET)因天然地克服光谱串扰的能力,在活细胞定量FRET检测中具备非常好的鲁棒性。利用表达不同模型质粒的乳腺癌MCF-7活细胞,在不同信噪比(R_(SN))的条件下分别进行了定量E-FRET和mExEm-spFRET测量,以FRET效率(E)和质粒供受体浓度比(R_(C))参量作为指标,评估二种方法的鲁棒性。对于R_(SN)>3的细胞,两种方法得到一致的E值,但是E-FRET方法得到的个别质粒R_(C)值偏小;对于R_(SN)<3的细胞,两种方法都能得到一致的R_(C)值,但是E-FRET方法得到的个别质粒E值误差率大于0.1,与文献值偏差稍大。E-FRET与mExEm-spFRET具有几乎一致的活细胞定量FRET检测能力,但是mExEm-spFRET的鲁棒性优于E-FRET方法。

关 键 词:光谱学 荧光共振能量转移(FRET)  定量FRET测量  活细胞 光谱线性分离  鲁棒性  

分 类 号:Q631]

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