期刊文章详细信息
活细胞定量FRET成像方法鲁棒性评估 ( EI收录)
Robustness Evaluation of Quantitative Fluorescence Resonance Energy Transfer Imaging Methods in Live Cells
文献类型:期刊文章
Yin Ao;Zhai Shixian;Sun Han;Liu Zhi;Zhuang Zhengfei;Chen Tongsheng(Key Laboratory of Laser Life Science,Ministry of Education,College of Biophotonics,South China Normal University,Guangzhou,Guangdong 510631,China;Guangdong Key Laboratory of Laser Life Science,College of Biophotonics,South China Normal University,Guangzhou,Guangdong 510631,China;SCNU Qingyuan Institute of Science and Technology Innovation Co.,Ltd.,Guangdong 511517,China)
机构地区:[1]华南师范大学生物光子学研究院教育部激光生命科学重点实验室,广东广州510631 [2]华南师范大学生物光子学研究院广东省激光生命科学重点实验室,广东广州510631 [3]师大瑞利光电科技(清远)有限公司,广东清远511517
基 金:国家自然科学基金(61875056);国家重大科研仪器研制项目(61527825);广州市科技计划(2019050001)。
年 份:2021
卷 号:48
期 号:21
起止页码:97-110
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EI、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:基于受体敏化的3-cube(通道)荧光共振能量转移(FRET)成像方法(通常称为E-FRET方法)是活细胞定量FRET检测中主流的成像分析技术。基于激发发射光谱线性分离的定量FRET检测方法(mExEm-spFRET)因天然地克服光谱串扰的能力,在活细胞定量FRET检测中具备非常好的鲁棒性。利用表达不同模型质粒的乳腺癌MCF-7活细胞,在不同信噪比(R_(SN))的条件下分别进行了定量E-FRET和mExEm-spFRET测量,以FRET效率(E)和质粒供受体浓度比(R_(C))参量作为指标,评估二种方法的鲁棒性。对于R_(SN)>3的细胞,两种方法得到一致的E值,但是E-FRET方法得到的个别质粒R_(C)值偏小;对于R_(SN)<3的细胞,两种方法都能得到一致的R_(C)值,但是E-FRET方法得到的个别质粒E值误差率大于0.1,与文献值偏差稍大。E-FRET与mExEm-spFRET具有几乎一致的活细胞定量FRET检测能力,但是mExEm-spFRET的鲁棒性优于E-FRET方法。
关 键 词:光谱学 荧光共振能量转移(FRET) 定量FRET测量 活细胞 光谱线性分离 鲁棒性
分 类 号:Q631]
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