文献类型：期刊文章

作　　者：张飞飞[1] 张梦[2] 王中山[1]

ZHANG Feifei;ZHANG Meng;WANG Zhongshan(Jiangsu Provincical Key Laboratory of Anesthesiology,College of Anesthesiology,Xuzhou Medical University,Xuzhou 221004,China;不详)

机构地区：[1]徐州医科大学麻醉学院,江苏省麻醉学重点实验室,江苏徐州221004 [2]徐州市中心医院,东南大学附属医院妇产科,江苏徐州221009

出　　处：《实用医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(编号:81600969)。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：22

起止页码：2840-2844

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的获得ETAR羧基末端58个氨基酸的多肽(ETAR-C58),探讨其对黑色素瘤A375细胞迁移和侵袭的影响。方法通过PCR方法获得ETAR-C58碱基序列,将其克隆到原核表达载体pWaldoGFPe,转化到大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达后,经镍柱亲和层析和分子筛层析,得到重组融合多肽,SDSPAGE分析多肽表达量和纯度,免疫印迹做进一步的鉴定。最后采用Transwell法测定A375细胞的迁移和侵袭能力。结果成功构建了重组表达载体pWaldo-ETAR-C58,优化表达条件获得了约90%的可溶性蛋白表达量,纯化获得纯度高达95%的融合多肽,免疫印迹的曝光条带和重组多肽的大小相一致,加入2μmol/L ETAR-C58后,A375细胞的迁移和侵袭能力显著下降(P <0.05)。结论 ETAR-C58多肽具有抗黑色素瘤的活性,为下一步的临床应用奠定了良好的基础。

关 键 词：ETAR羧基末端  原核表达  黑色素瘤 细胞迁移 细胞侵袭

分 类 号：R739.5]