文献类型：期刊文章

作　　者：董素芳[1] 谭晶晶[2] 刘成利[1] 费鹏[1] 夏乾峰[1]

DONF Su-fang;TAN Jing-jing;LIU Cheng-li;FEI Peng;XIA Qiang-feng(School of Tropical Medicine and Laboratory Medicine,Laboratory of Tropical Biomedicine and Biotechnology,Hainan Medical University,Haikou,Hainan 571199,China;Clinical Laboratory of Wuhan Hospital of Traditional Chinese Medicine,Wuhan,Hubei 430010,China)

机构地区：[1]海南医学院热带医学与检验医学院,热带生物医学技术实验室,海南海口571199 [2]武汉市中医院检验科

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：海南省自然科学基金项目(No.817138);海南省科协青年科技英才创新计划项目(No.QCXM201701);大学生创新创业训练计划项目(No.HYCX2018014)。

年　　份：2021

卷　　号：16

期　　号：10

起止页码：1163-1167

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CSCD、CSCD2021_2022、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的对类鼻疽伯克霍尔德菌TssE-6蛋白进行原核表达和蛋白纯化并进行生物信息学分析。方法采用BamHI和HindⅢ双酶切PCR纯化产物和pET30a(+)载体后连接,构建pET30a(+)-tssE-6重组质粒,转化到BL21大肠埃希菌中,利用1 mmol/L ITPG诱导,获得目的蛋白,进行10%SDS-PAGE、Western blot验证及Ni;柱纯化,利用生物学信息学软件对TssE-6蛋白进行预测和分析。结果成功对TssE-6蛋白进行了原核表达,经10%SDS-PAGE和Western blot验证,包含组氨酸标签的蛋白相对分子质量为24.2×10^(3)。TssE-6为不可溶包涵体蛋白,Ni;柱纯化蛋白的浓度为3.0 mg/ml,目的条带单一。TssE-6蛋白为含有170个氨基酸的不稳定亲水蛋白,带负电荷,分子式C_(851)H_(1349)N_(235)O_(255)S_(7),理论相对分子质量为19.176 91×10^(3),二级结构中α螺旋和无规卷曲分别占46.47%和40.00%。结论获得高纯度的重组TssE-6蛋白,预测该蛋白具有亲水性,为进一步研究TssE-6在T6SS中的功能以及新的检测标志物奠定了理论基础。

关 键 词：类鼻疽伯克霍尔德菌 VI型分泌系统  TssE-6  原核表达 生物信息学分析

分 类 号：R378]