文献类型：期刊文章

作　　者：聂锋[1] 侯茂奇[1] 赵嘉宁[1] 王如锋[1] 赵淑娟[1]

NIE Feng;HOU Maoqi;ZHAO Jianing;WANG Rufeng;ZHAO Shujuan(Institute of Chinese Materia Medica,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,SATCM Key Laboratory for New Resources&Quality Evaluation of Chinese Medicine,MOE Key Laboratory for Standardization of Chinese Medicine,Shanghai Key Lahoraton of Compound Chinese Medicine,Shanghai 201203,China)

机构地区：[1]上海中医药大学中药研究所,中药新资源与品质评价国家中医药管理局重点研究室,中药标准化教育部重点研究室,上海市中药复方重点实验室,上海201203

出　　处：《上海中医药大学学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81573581)。

年　　份：2021

卷　　号：35

期　　号：6

起止页码：73-81

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:将前期克隆得到21条三七来源的糖基转移酶基因,构建到pCold表达载体,以实现重组蛋白的可溶性表达,并筛选、鉴定其在体外对黄酮类化合物的催化功能。方法:对21条糖基转移酶基因进行系统进化树分析;利用同源重组的方法将其克隆到pCold表达载体上,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。低温诱导重组蛋白表达,以黄酮类化合物为糖基受体底物,UDP-葡萄糖为糖基供体,采用高效液相色谱法(HPLC)检测酶促反应产物。结果:分别以山柰酚和芹菜素为底物,重组蛋白PnUGT82参与反应后,可检测到山柰酚7-O葡萄糖苷和芹菜素7-O葡萄糖苷,而阴性对照组未检测到对应的糖苷产物。结论:筛选得到1条三七来源的糖基转移酶PnUGT82,能够催化黄酮类化合物,在体外将UDP-葡萄糖上的葡萄糖基团转移到山柰酚或芹菜素7位羟基,形成相应的黄酮7-O糖苷化产物。

关 键 词：三七  黄酮 糖基转移酶 重组蛋白 催化功能  

分 类 号：R284[中药学类]