文献类型：期刊文章

作　　者：覃明[1] 王海燕[2] 田丹[1] 郑静[1] 汪化军[1] 冯仁和[1] 庹宇宇[1] 张悦[1] 李妍霓[1] 张浪浪[1] 杨婷婷[2]

Qin Ming;Wang Haiyan;Tian Dan;Zheng Jing;Wang Huajun;Feng Renhe;Tuo Yuyu;Zhang Yue;Li Yanni;Zhang Langlang;Yang Tingting(Department of Immunology,School of Preclinical Medicine,Zunyi Medical University,Zunyi Guizhou 563099,China;Department of Epidemiology and Health Statistics,School of Public Health,Zunyi Medical University,Zunyi Guizhou 563099,China)

机构地区：[1]遵义医科大学基础医学院免疫学教研室,贵州遵义563099 [2]遵义医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室,贵州遵义563099

出　　处：《遵义医科大学学报》

基　　金：遵义医科大学2018年度学术新苗培养及创新探索专项资助项目(NO:黔科合平台人才[2018]5772-015);遵义医科大学青年学术骨干培养支持经费资助项目(NO:JC2018-4);遵义市科技计划资助项目(NO:遵市科合社字[2018]05)。

年　　份：2021

卷　　号：44

期　　号：5

起止页码：669-672

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的介绍一种胱硫醚-γ-裂解酶(Cystathionine-γ-lyase,CSE)基因敲除小鼠基因型的鉴定方法。方法提取3只野生型(Wild type,WT)小鼠(CSE^(+/+))和21只杂合子小鼠(CSE^(+/-))繁殖的子代小鼠的鼠尾基因组DNA,以其为模板,聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增后凝胶电泳;然后分别提取3只WT小鼠和6只随机选择的CSE基因敲除小鼠(CSE^(-/-))肠道组织和骨髓来源的巨噬细胞(Bone marrow-derived macrophage,BMDM)蛋白,并用免疫印迹法(Western blot)检测其中CSE蛋白的表达。结果凝胶电泳结果显示:只在167 bp处有表达的是WT鼠或CSE^(+/+)小鼠;在167 bp处、309 bp处均有表达的是CSE^(+/-)小鼠;只在309 bp处有表达的是CSE^(-/-)小鼠。Western blot检测结果表明,与野生鼠相比,CSE^(-/-)小鼠肠道组织和BMDM中CSE蛋白表达显著性降低(P<0.01),与凝胶电泳实验结果一致。结论采用PCR结合凝胶电泳的方法鉴定CSE基因敲除小鼠的基因型是一种较为准确的鉴定方法,此方法可以为使用该动物的实验研究节约经济成本和时间成本。

关 键 词：CSE  基因敲除 基因型鉴定 聚合酶链反应 凝胶电泳

分 类 号：R332]