文献类型：期刊文章

作　　者：宫雅娟[1] 马芳[1] 张楠[1] 郝艳梅[1]

Gong Yajuan;Ma Fang;Zhang Nan;Hao Yanmei(Department of clinical laboratory diagnostics,school of laboratory medicine,Bengbu Medical College,Bengbu,Anhui,233030,China)

机构地区：[1]蚌埠医学院检验医学院临床检验诊断学教研室,安徽蚌埠233030

出　　处：《齐齐哈尔医学院学报》

基　　金：安徽省教育厅重点项目(KJ2018A1008);蚌埠医学院自然科学基金面上项目(BYKY1872)。

年　　份：2021

卷　　号：42

期　　号：22

起止页码：1933-1937

语　　种：中文

收录情况：JST、普通刊

摘　　要：目的研究上调乙酰基转移酶(HBO1)基因对亚溶解型C5b-9复合物刺激大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)生成趋化因子CCL5的作用机制。方法构建外源性真核表达重组质粒pIRES2-HBO1,利用NeonTM电转仪将重组质粒转染至体外培养的GMCs中,免疫印迹(WB)实验鉴定外源性过表达HBO1的结果。再进行分组实验(MEM组、pIRES2组、亚溶解型C5b-9组,以及pIRES2-HBO1+亚溶解型C5b-9组)。分别用实时PCR和ELISA法检查不同分组处理后CCL5的mRNA和蛋白水平,并用荧光素酶报告实验检测CCL5的启动子活性情况。结果WB实验表明,真核表达重组质粒pIRES2-HBO1构建成功。用pIRES2-HBO1转染GMCs后,GMCs在亚溶解型C5b-9复合物的刺激下生成CCL5基因的水平及其启动子活性均显著升高。结论成功构建了pIRES2-HBO1真核表达重组质粒,并初步证实HBO1基因表达能够正向调控亚溶解型C5b-9诱导大鼠GMCs生成趋化因子CCL5。

关 键 词：HBO1基因  亚溶解型C5b-9  肾小球系膜细胞 C-C基序趋化因子5  

分 类 号：R692]