文献类型：期刊文章

作　　者：史宗勇[1,2] 刘璇[1,2] 许冬梅[1,2] 李夏莹[3] 陈子言[3] 梁晋刚[3] 王颢潜[3] 张雨琪[2] 温洪涛[4] 张秀杰[3] 高建华[2,5]

SHI Zong-Yong;LIU Xuan;XU Dong-Mei;LI Xia-Ying;CHEN Zi-Yan;LIANG Jin-Gang;WANG Hao-Qian;ZHANG Yu-Qi;WEN Hong-Tao;ZHANG Xiu-Jie;GAO Jian-Hua(Department of Bioinformatics,College of Life Sciences,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi,China;Crops Ecological Environment Security Inspection and Supervision Center(Taiyuan),Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Taigu 030801,Shanxi,China;Development Center for Science and Technology,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Beijing 100025,China;Quality and Safety Institute of Agricultural Products,Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences,Harbin 150086,China;Department of Bioscience,College of Life Sciences,Shanxi Agricultural University,Taigu 030801,Shanxi,China)

机构地区：[1]山西农业大学生命科学学院生物信息系,山西太谷030801 [2]农业农村部农作物生态环境安全监督检验测试中心(太原),山西太谷030801 [3]农业农村部科技发展中心,北京100025 [4]黑龙江农业科学院农产品质量安全研究所,哈尔滨150086 [5]山西农业大学生命科学学院生物科学系,山西太谷030801

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：国家科技重大专项(No.2018ZX08012001-009)资助。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：11

起止页码：1540-1554

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：随着我国批准进口和自主研制的转基因大豆转化体数量不断增加,亟需建立覆盖全面、检测靶标数量较少且符合国情的快速筛查方案。另外,为了控制检测工作量,还需构建对应的多靶标质粒(multi-targets plasmid,MTP)分子,作为大豆转基因成分检测的阳性物质。本文通过收集整理相关转化体的分子特征信息,获得了29种转基因大豆独立转化体的外源转化元件信息。全面分析其组成情况及使用频率,同时结合我国转基因检测相关标准方法,从而确定一套新的筛查方案。该方案包括8个检测靶标,CaMV 35S启动子(P-35S)、NOS终止子(T-nos)、耐除草剂基因pat、E9终止子(T-E9)、抗虫基因cry1Ac、AHAS启动子(P-AHAS)、pinⅡ终止子(T-pinⅡ)和DP305423转化体的特征序列,以及1个大豆内标准基因Lectin。通过这9个靶标序列的检测,可全面筛查上述29种转基因大豆独立转化体。本文将其称为转基因大豆筛查的"8+1"方案。将这9种靶标的检测序列串联并接入pUC18质粒,获得MTP分子pDDSC-1910。为了验证该分子作为阳性物质的适用性,以其为模板,对9种靶标进行定性PCR分析,结果均能获得预期的特异性扩增产物,且表现出较高的灵敏度。因此,本文建立了一个覆盖全面的转基因大豆筛查新方案,并成功构建了相应的MTP分子作为阳性物质,为转基因大豆的高效筛查和检测工作提供便利。

关 键 词：转基因大豆 筛查  外源元件  阳性物质  质粒

分 类 号：S565.1]