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鸭坦布苏病毒、新型鸭呼肠孤病毒及番鸭呼肠孤病毒多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立与临床应用
Establishment and clinical application of multiplex TaqMan real-time RT-PCR for differential detection of DTMUV,NDRV and MDRV
文献类型:期刊文章
XIE Shou-yu;LIU Hui-xin;YIN Yan-wen;SHI Kai-chuang;QU Su-jie;LU Wen-jun;HUANG Xiao-wu;LIAO Dong-an;WANG Lu-xia;WU Shuang-yan(Guangxi Center for Animal Disease Control and Prevention,Nanning 530001,China;College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China;Liuzhou Center for Animal Disease Control and Prevention,Liuzhou 545006,China;Zhongshan Town of Hezhou Center for Animal Disease Control and Prevention,Hezhou 542699,China;Baise Center for Animal Disease Control and Prevention,Baise 533000,China;Luzhai town of Liuzhou Center for Animal Disease Control and Prevention,Liuzhou 545600,China)
机构地区:[1]广西动物疫病预防控制中心,广西南宁530001 [2]广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005 [3]柳州市动物疫病预防控制中心,广西柳州545006 [4]贺州市钟山县动物疫病预防控制中心,广西贺州542699 [5]百色市动物疫病预防控制中心,广西百色533000 [6]柳州市鹿寨县动物疫病预防控制中心,广西柳州545600
基 金:广西自然科学基金项目(2020GXNSFBA297066);广西农业科技项目(Z201984、Z202032)。
年 份:2021
卷 号:43
期 号:9
起止页码:952-958
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:为建立鉴别检测鸭坦布苏病毒(DTMUV)、新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)及番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的方法,本研究分别针对DTMUV E基因与NDRV、MDRV S3基因,设计特异性引物和Taq Man探针,经优化反应条件,建立了同一体系中同时检测DTMUV、NDRV及MDRV的Taq Man荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法仅能扩增DTMUV、NDRV及MDRV,与禽呼肠孤病毒(ARV)、禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、减蛋综合征病毒(EDSV)、鸭瘟病毒(DEV)等主要禽源病毒均无交叉反应,特异性强;对DTMUV、NDRV及MDRV质粒标准品的检测下限均为7.5×10^(1)拷贝/μL,敏感性高;组内与组间重复性试验变异系数均小于2.5%,重复性好。利用该方法与已报道的坦布苏病毒荧光定量RT-PCR方法及NDRV与MDRV双重RTPCR方法同时检测82份临床疑似患病鸭的肝脾组织样品,结果检出阳性样品22份,其中,DTMUV阳性检出率为10.98%(9/82),NDRV阳性检出率为2.44%(2/82),MDRV阳性检出率为13.41%(11/82),检出阴性样品60份。与参考方法的检测结果一致,三者的符合率达100%。本研究建立的方法为临床DTMUV、NDRV及MDRV鉴别检测和流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术支撑。
关 键 词:鸭坦布苏病毒 新型鸭呼肠孤病毒 番鸭呼肠孤病毒 荧光定量RT-PCR 临床应用
分 类 号:S852.65]
参考文献:
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引证文献:
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