文献类型：期刊文章

作　　者：李刚[1] 宋平丽[1] 王翔[1] 马青翠[1] 张海霞[1] 张玉星[1] 许建锋[1] 亓宝秀[1,2]

LI Gang;SONG Pingli;WANG Xiang;MA Qingcui;ZHANG Haixia;ZHANG Yuxing;XU Jianfeng;QI Baoxiu(College of Horticulture,Hebei Agricultural University,Pear Engineering and Technology Center of Hebei Province,Baoding 071001,Hebei,China;School of Pharmacy and Biomolecular Sciences,Liverpool John Moores University,Liverpool L33AF,United Kingdom)

机构地区：[1]河北农业大学园艺学院,河北省梨工程技术研究中心,河北保定071001 [2]英国利物浦约翰摩尔大学,药学和分子生物学学院,英国利物浦L33AF

出　　处：《果树学报》

基　　金：国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-28-9);河北省研究生创新资助项目(CXZZBS2018116)。

年　　份：2021

卷　　号：38

期　　号：11

起止页码：2006-2013

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】探寻一种由农杆菌介导的杜梨叶片瞬时转化的最佳方法。【方法】以杜梨组织培养的幼嫩叶片为材料,将含有GUS基因的pBI121植物表达载体转化农杆菌GV3101和EHA105,设计3因子3水平正交试验L9(33),采用不同农杆菌菌液浓度、不同真空渗入时间,侵染叶片组织细胞,取不同时间共培养后的叶片观察GUS染色情况。【结果】GV3101和EHA105均能高效侵染转化杜梨叶片,使GUS蛋白表达,但其转化效率不同。农杆菌GV3101在菌液OD600为0.8,真空渗入20 min,共培养4 d后,杜梨叶片的转化效率即可达到100%,且叶片坏死率仅为13.09%;EHA105在OD600为0.8,真空渗入30 min,共培养6 d,或菌液OD600为1.0,真空渗入10 min,共培养2 d的条件下转化效率最高,均为83.33%,但是,叶片坏死率分别为27.78%和15.26%,然而在菌液OD600为1.0,真空侵染时间20 min,共培养4 d后,叶片转化效率为75.79%,但叶片坏死率大大降低,仅为5.00%。【结论】菌株GV3101和EHA105均能高效侵染转化杜梨叶片,最高转化效率分别为100%和83.33%,所以菌株GV3101转化效率高于EHA105。考虑到叶片坏死率,菌株GV3101瞬时转化杜梨叶片的最适条件为:菌液OD600为0.8,真空渗入时间20 min,共培养4 d,转化效率100%,叶片坏死率13.09%;菌株EHA105瞬时转化杜梨叶片的最适条件为:菌液OD600为1.0,真空渗入20 min,共培养4 d,转化效率75.79%,叶片坏死率5.00%。

关 键 词：杜梨 组织培养  叶片 农杆菌 瞬时转化  β-葡糖醛酸酶  

分 类 号：S661.2]