文献类型：期刊文章

作　　者：姜霞[1] 王平[2]

JIANG Xia;WANG Ping(Department of Pathology,Hubei University of Chinese Medicine,Wuhan 430065;Institute of Gerontology,Hubei University of Chinese Medicine,Wuhan 430065)

机构地区：[1]湖北中医药大学基础医学院病理学教研室,武汉430065 [2]湖北中医药大学老年病研究所,武汉430065

出　　处：《中国中西医结合杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81973721,No.81303252);湖北省自然科学基金项目(No.2017CFB733)

年　　份：2021

卷　　号：41

期　　号：9

起止页码：1080-1086

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、IC、JST、PUBMED、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究淫羊藿苷(ICA)对β-淀粉样蛋白肽25-35(Aβ25-35)诱导的小鼠神经瘤母细胞(N2a)Aβ含量和自噬溶酶体途径的影响。方法 N2a细胞培养基加入不同浓度的ICA(0.05、0.1、0.2 μmol/L)孵育6 h,再将20 μmol/L老化的Aβ25-35处理24 h。实验分为5组:对照组(DMSO)、AD细胞模型组(Aβ25-35)、0.05 μmol/L ICA 干预组(Aβ25-35+ICA0.05)、0.1 μmol/L ICA 干预组(Aβ25-35+ICAO.1)、0.2 μmol/L ICA 干预组(Aβ25-35+ICA0.2)。将 0.2 μmol/L 的 ICA 预处理 N2a 细胞2、4、6 h,再加入Aβ25-35处理24 h。收集细胞和培养基,ELISA法测定细胞内外Aβ40及Aβ42含量;免疫印迹法检测LC3、P62、p70S6K及其苏氨酸389位点磷酸化(p-p70S6K,活性形式)的表达;采用细胞免疫荧光技术观察LC3和4G8(识别Aβ17-24片段)的染色强度及LAMP2和4G8共定位情况。结果与对照组比较,AD细胞模型组细胞存活率降低(P<0.05),细胞内外Aβ42及Aβ40的含量增加(P<0.01,P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和P62蛋白表达均增加(P<0.05),p-p70S6K表达增加(P<0.01)。与AD细胞模型组比较,0.05、0.1和0.2 μmol/L ICA干预组细胞活力下降(P<0.05),0.2 μmol/L ICA干预组细胞内外Aβ42及Aβ40含量降低(P<0.05),0.1 和 0.2 μmol/L 干预组 ICALC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ和 4G8 蛋白表达降低(P<0.05)。0.2 μmol/L ICA预处理4、6 h可明显降低AD细胞模型细胞内外Aβ42和Aβ40的含量,降低LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ和P62蛋白表达及p-p70S6K/p70S6K(P<0.05)。结论ICA可抑制Aβ25-35诱导的N2a细胞自噬,降低p70S6K活性并减少细胞内外Aβ。

关 键 词：淫羊藿苷 小鼠神经瘤母细胞  β样淀粉蛋白肽  自噬  

分 类 号：R285[中药学类]