文献类型：期刊文章

作　　者：庄泽锐[1,2] 刘明发[1] 骆健明[3] 许宏武[4] 张冰娜[5] 余汉辉[1] 吴逸[1] 许海雄[1]

Zhuang Zerui;Liu Mingfa;Luo Jianming;Xu Hongwu;Zhang Bingna;Yu Hanhui;Wu Yi;Xu Haixiong(Department of Neurosurgery,Shantou Central Hospital,Shantou 515000,China;Department of Neurosurgery,Sun Yat-Sen Memorial Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 5J0J20,China;Department of Neurosurgery,Second Affiliated Hospital,Shantou University Medical College,Shantou 515000,China;Department of Neurosurgery,First Affiliated Hospital y Shantou University Medical College,Shantou 515000,China;Translat.ional Medicine Center,Second Affiliated Hospital,Shantou University)

机构地区：[1]汕头市中心医院神经外科,515000 [2]中山大学孙逸仙纪念医院神经外科,510120 [3]汕头大学医学院第二附属医院神经外科,515000 [4]汕头大学医学院第一附属医院神经外科,515000 [5]汕头大学医学院第二附属医院转化医学中心,515000

出　　处：《中华创伤杂志》

基　　金：广东省自然科学基金(2021A1515011179);广东省科技创新战略专项项目(汕府科[2018]157号-47);广东省科技专项项目(汕府科[2019]113号-137)。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：9

起止页码：833-840

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)表达对减轻谷氨酸兴奋性毒性进而发挥神经元保护的作用机制。方法慢病毒介导MAPK14干扰载体由上海吉凯基因化学技术有限公司合成,星形胶质细胞从出生48 h的SD大鼠获取,通过慢病毒介导转染体外培养的星形胶质细胞,按照随机数字表法分为三组:(1)未转染组,为正常星形胶质细胞,细胞加入杜氏培养液(DMEM)进行培养;(2)阴性对照组,转染MAPK14空载干扰载体;(3)慢病毒转染组,转染MAPK14干扰载体。转染72 h后星形胶质细胞与神经元共培养48 h,随后构建谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h。检测指标包括:慢病毒载体转染星形胶质细胞最佳转染指数(MOI);rPCR检测转染72 h后MAPK14和谷氨酸转运蛋白1(GLT-1)mRNA表达水平;Western blot检测转染72 h后MAPK14及GLT-1蛋白表达水平;分光光度法和流式细胞术分别检测谷氨酸兴奋性毒性环境作用2 h后神经元乳酸脱氢酶(LDH)水平和神经元死亡率。结果(1)慢病毒转染星形胶质细胞最佳MOI值为30,转染后的星形胶质细胞生长良好。(2)转染72 h后,与未转染组(0.0131±0.0011)和阴性对照组(0.0139±0.0010)比较,慢病毒转染组MAPK14 mRNA表达水平(0.0057±0.0006)显著下降(P<0.01);与未转染组(0.0087±0.0003)和阴性对照组(0.0089±0.0011)比较,慢病毒转染组GLT-1 mRNA表达水平(0.0091±0.0012)未见明显变化(P>0.05)。(3)转染72 h后,与未转染组(0.61±0.05)和阴性对照组(0.63±0.01)比较,慢病毒转染组MAPK14蛋白表达水平(0.29±0.04)显著下降(P<0.01);与未转染组(0.20±0.03)和阴性对照组(0.23±0.09)比较,慢病毒转染组GLT-1蛋白表达水平(0.73±0.06)显著上升(P<0.01)。(4)谷氨酸兴奋毒性作用2 h后,慢病毒转染组LDH水平[(109.67±2.40)U/L]较未转染组[(141.52±3.88)U/L]和阴性对照组[(141.29±3.61)U/L]显著降低(P<0.01),慢病毒转染组神经元死亡率[(38.72±0.26)%]较未转染组[(52.94±1.36)%]

关 键 词：脑损伤 谷氨酸 丝裂原活化蛋白激酶14  兴奋性毒性

分 类 号：R651.15]