文献类型：期刊文章

作　　者：孙培培[1] 朱慧欣[1] 延君芳[1] 刘文文[1] 姜平[1] 白娟[1]

SUN Pei-pei;ZHU Hui-xin;YAN Jun-fang;LIU Wen-wen;JIANG Ping;BAI Juan(Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology,Ministry of Agriculture/College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)

机构地区：[1]南京农业大学,动物医学院,农业部动物细菌学重点实验室,江苏南京210095

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：国家生猪现代产业体系建设专项(CARS-36)。

年　　份：2021

卷　　号：51

期　　号：9

起止页码：1097-1105

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为加强塞内卡病毒A(Seneca virus A,SVA)的鉴别诊断及流行病学监测。本研究以SVA重组VP2蛋白及其对应的辣根过氧化酶(HRP)标记的单克隆抗体,建立了检测SVA抗体的阻断ELISA方法。该方法优化后,抗原最佳包被浓度为0.25μg/m L,37℃孵育2 h后4℃过夜;最佳封闭液为1%BSA,37℃孵育1 h;待检血清最佳稀释度为1∶1,37℃孵育1.5 h;酶标单抗最佳稀释度为1∶1000,37℃作用45 min;TMB最佳显色时间为37℃作用10~15 min。本方法的判定标准:当阻断率(PI)≥41.25%时为阳性,PI≤25.29%时为阴性,25.29%<PI<41.25%时为可疑。该方法与FMDV、PRV、PRRSV、CSFV和PCV2等参考阳性血清均无交叉反应性。批内和批间重复性试验结果显示,变异系数均小于11%。与中和试验的符合率为70.1%。对506份临床猪血清样品的检测结果显示,SVA抗体阳性率达74.5%。综上所述,本研究建立的阻断ELISA方法具有良好的特异性与稳定性,可用于检测血清中的SVA抗体。

关 键 词：塞内卡病毒A  VP2蛋白 单克隆抗体 阻断ELISA

分 类 号：S852.659.6]