期刊文章详细信息
牛肉PCR-核酸试纸条快速鉴定方法的建立及试剂盒的研制
Establishment of a rapid identification method on PCR-nucleic acid strip for beef and development of kits
文献类型:期刊文章
JIANG Haiying;ZHANG Zhijie;WANG Yanshuang;ZHANG Li;GAO Lijun;LI Mingcheng;SUN Liyuan;ZHANG Lihua(Medical Technology School,Beihua University,Jilin 132013,China;Clinical College,Beihua University,Jilin 132013,China;Medical College,Beihua University,Jilin 132013,China;Chinese Medicine DNA Fingerprint Detection Technology Technology Innovation Center,Beihua University,Jilin 132013,China;Jilin No.32 Middle School,Jilin 132013,China;Jilin Leining Food and Drug Testing Technology Service Co.Ltd.,Jilin 132013,China)
机构地区:[1]北华大学医学技术学院,吉林吉林132013 [2]北华大学临床学院,吉林吉林132013 [3]北华大学医学院,吉林吉林132013 [4]北华大学吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心,吉林吉林132013 [5]吉林市第三十二中学,吉林吉林132013 [6]吉林雷宁食品药品检测技术服务有限公司,吉林吉林132013
基 金:吉林省科技发展计划项目(20190303093SF,20190301014NY,20200404152YY,20200403047SF);吉林省科技创新中心建设项目(20190902018TC);吉林省北华大学大学生创新创业训练计划项目(S202110201120)。
年 份:2021
卷 号:47
期 号:18
起止页码:275-281
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:该研究建立肉类食品中牛肉PCR-核酸试纸条快速鉴定方法,并开发快速检测试剂盒。对国家标准中牛的特异性引物进行标记,研发牛肉DNA快速提取试剂和基因检测试剂,采用核酸试纸条进行可视化检测;应用分子克隆及测序技术,克隆牛肉标准品;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察。提取基因组DNA的方法简单、快速,DNA的完整性、浓度及纯度均非常好;退火温度59℃、在20个循环时试纸条检测结果最特异,牛肉正品均出现2条条带,易混品及空白对照均出现1条条带。克隆测序后的牛肉DNA序列与牛线粒体DNA特异指纹区段序列同源性100%。自主研发的试剂盒特异性、重现性、稳定性良好,模板DNA最低检出量为1 pg/μL。该研究建立的PCR-核酸试纸条方法特异性强、灵敏、准确、简便、快速;研制的试剂盒操作简便快速、结果可视稳定,适用于实地监测。
关 键 词:PCR 核酸试纸条 牛肉 快速检测试剂盒 分子克隆 测序
分 类 号:TS251.7]
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