文献类型：期刊文章

作　　者：姜海瀛[1] 张志杰[2] 王艳双[3,4] 张莉[5] 高丽君[1] 李明成[1,4] 孙丽媛[1] 张丽华[6]

JIANG Haiying;ZHANG Zhijie;WANG Yanshuang;ZHANG Li;GAO Lijun;LI Mingcheng;SUN Liyuan;ZHANG Lihua(Medical Technology School,Beihua University,Jilin 132013,China;Clinical College,Beihua University,Jilin 132013,China;Medical College,Beihua University,Jilin 132013,China;Chinese Medicine DNA Fingerprint Detection Technology Technology Innovation Center,Beihua University,Jilin 132013,China;Jilin No.32 Middle School,Jilin 132013,China;Jilin Leining Food and Drug Testing Technology Service Co.Ltd.,Jilin 132013,China)

机构地区：[1]北华大学医学技术学院,吉林吉林132013 [2]北华大学临床学院,吉林吉林132013 [3]北华大学医学院,吉林吉林132013 [4]北华大学吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心,吉林吉林132013 [5]吉林市第三十二中学,吉林吉林132013 [6]吉林雷宁食品药品检测技术服务有限公司,吉林吉林132013

出　　处：《食品与发酵工业》

基　　金：吉林省科技发展计划项目(20190303093SF,20190301014NY,20200404152YY,20200403047SF);吉林省科技创新中心建设项目(20190902018TC);吉林省北华大学大学生创新创业训练计划项目(S202110201120)。

年　　份：2021

卷　　号：47

期　　号：18

起止页码：275-281

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：该研究建立肉类食品中牛肉PCR-核酸试纸条快速鉴定方法,并开发快速检测试剂盒。对国家标准中牛的特异性引物进行标记,研发牛肉DNA快速提取试剂和基因检测试剂,采用核酸试纸条进行可视化检测;应用分子克隆及测序技术,克隆牛肉标准品;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察。提取基因组DNA的方法简单、快速,DNA的完整性、浓度及纯度均非常好;退火温度59℃、在20个循环时试纸条检测结果最特异,牛肉正品均出现2条条带,易混品及空白对照均出现1条条带。克隆测序后的牛肉DNA序列与牛线粒体DNA特异指纹区段序列同源性100%。自主研发的试剂盒特异性、重现性、稳定性良好,模板DNA最低检出量为1 pg/μL。该研究建立的PCR-核酸试纸条方法特异性强、灵敏、准确、简便、快速;研制的试剂盒操作简便快速、结果可视稳定,适用于实地监测。

关 键 词：PCR 核酸试纸条  牛肉 快速检测试剂盒 分子克隆 测序

分 类 号：TS251.7]