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生姜青枯病病原菌的鉴定与PCR检测方法的建立
Isolation and Identification ofthe Pathogen of Ginger Bacterial Wilt and Establishment of a PCR Detection System
文献类型:期刊文章
ZHANG Lingling;ZHOU Jie;QIN Manli;ZHOU Xian;WU Lin;LIU Yiqing(College of Horticulture and Gardening,Yangtze University,Jingzhou Hubei 434000,China;Fuyuan Agricultural Biotechnology Research Institute Co.LTD.of Chongqing City,Yongchuan Chongqing 402160,China;Institute of Special Plants,Chongqing University of Arts and Sciences,Yongchuan Chongqing 402160,China)
机构地区:[1]长江大学园艺园林学院,湖北荆州434000 [2]重庆市幅沅农业生物技术研究院有限公司,重庆永川402160 [3]重庆文理学院特色植物研究院,重庆永川402160
基 金:湖北省重点研发项目(2020BBA037);重庆调味品产业体系重大专项项目((2017-2021)-7);重庆英才计划创新创业团队项目(CQYC201903201).
年 份:2021
卷 号:43
期 号:9
起止页码:10-20
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:青枯病是一种严重危害生姜种植的毁灭性土传细菌病害,明确引起生姜青枯病的病原菌并对其进行快速检测,对生姜青枯病早期诊断与有效防控具有重要意义.本研究采用组织分离法,对湖北省恩施生姜病样上的病菌进行分离纯化,通过形态学特征、致病性测定和分子生物学的方法对其进行鉴定;筛选并验证了生姜青枯病菌的特异性引物,优化生姜青枯病病原菌的PCR检测方法,并对该方法进行特异性和灵敏度验证,运用该方法对生姜植株和土壤的病原菌进行检测.结果表明,试验分离纯化得到了10株培养性状一致的菌株,从形态学特征、致病性测定和分子生物学方面,将代表菌株ES202023鉴定为青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum);引物21F/21R从所获菌株中扩增出长度为125 bp的特异性目的条带;通过优化后的PCR体系(25μL:2×Taq Master PCR Mix 12.5μL, 21F/21R 0.5μL,退火温度61.1℃, 30个循环),使病原菌的检测灵敏度达到10-2 ng/μL,且可以在感病植株及土壤中检测到病原菌.本研究建立的特异性PCR快速检测方法,对生姜青枯病的田间早期预警、姜种带菌检测和绿色防控具有指导作用.
关 键 词:生姜 青枯病 分离鉴定 PCR检测方法
分 类 号:S632.5] S436.412.15]
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引证文献:
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