文献类型：期刊文章

作　　者：林超平[1,2] 汤江涛[1,2] 郑仁朝[1,2] 郑裕国[1,2]

Chaoping Lin;Jiangtao Tang;Renchao Zheng;Yuguo Zheng(Key Laboratory of Bioorganic Synthesis of Zhejiang Province,College of Biotechnology and Bioengineering,Zhejiang University of Technology,Hangzhou 310014,Zhejiang,China;Engineering Research Center of Bioconversion and Biopurification,Ministry of Education,College of Biotechnology and Bioengineering,Zhejiang University of Technology,Hangzhou 310014,Zhejiang,China)

机构地区：[1]浙江工业大学生物工程学院生物有机合成技术研究浙江省重点实验室,浙江杭州310014 [2]浙江工业大学生物工程学院生物转化与生物净化教育部工程研究中心,浙江杭州310014

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家重点研发计划(No.2017YFE0129400);浙江省博士后科研择优资助项目(No.ZJ2020125)资助。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：8

起止页码：2936-2946

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以微水溶剂热法快速制备的稳定锆基金属有机框架为载体,戊二醛为交联剂,采用交联法对酰胺酶进行固定化,考察了不同条件对酰胺酶固定化效率的影响。结果表明,戊二醛浓度为1.0%、交联时间为180 min、载体与酶的质量比为8︰1,固定化效率最佳,固定化酶活力回收率达86.4%,蛋白负载量达115.3 mg/g。固定化酶最适温度为40℃,最适pH值为9.0,在40℃下半衰期为72.2 d,该固定化酶的K_(m)为58.32 mmol/L,V_(max)为16.23μmol/(min·mg),k_(cat)为1670s^(-1)。此外,考察了固定化酶催化合成(S)-4-氟苯甘氨酸的工艺:最适底物浓度300mmol/L,固定化酶用量10 g/L,反应时间180 min,在最佳反应条件下转化率达49.9%,对映体过量(Enantiomeric excess,e.e.)为99.9%。进一步考察了该固定化酶分批催化反应性能,重复使用20批次后,固定化酶活力仍保留95.8%。

关 键 词：金属有机框架  酰胺酶 固定化 (S)-4-氟苯甘氨酸  

分 类 号：Q814.2[生物工程类]