文献类型：期刊文章

作　　者：耿梦雅[1,2,3] 王李卓[4,5] 章尧[4,5] 裴文俊[4] 漆梦湘[3] 杨梦[3] 许家豪[3] 梁洋洋[3] 吕坤[6,7] 何春玲[1] 高家林[1,2,4]

GENG Mengya;WANG Lizhu;ZHANG Yao;PEIWenjun;QI Mengxiang;YANG Meng;XU Jiahao;LIANG Yangyang;LV Kun;HE Chunling;GAO Jialin(Department of Endocrinology and Genetic Metabolism,Wannan Medical College,Wuhu 241002,China;Institute of Endocrine and Metabolic Diseases,Yijishan Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 241002,China;School of Clinical Medicine,Wannan Medical College,Wuhu 241002,China;Anhui Provincial Key Laboratory of Biological Macro-molecules Research,Wannan Medical College,Wuhu 241002,China;Department of Biochemistry and Molecular Biology,Wannan Medical College,Wuhu 241002,China;Central Laboratory,Wannan Medical College,Wuhu 241002,China;Anhui Provincial College Key Laboratory of Non-coding RNA Transformation Research on Critical Diseases,Wannan Medical College,Wuhu 241002,China)

机构地区：[1]皖南医学院弋矶山医院内分泌科,安徽芜湖241002 [2]皖南医学院弋矶山医院内分泌糖尿病研究所,安徽芜湖241002 [3]皖南医学院临床医学院,安徽芜湖241002 [4]皖南医学院安徽省活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖241002 [5]皖南医学院基础医学院生化教研室,安徽芜湖241002 [6]皖南医学院中心实验室,安徽芜湖241002 [7]皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室,安徽芜湖241002

出　　处：《南方医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(81471002,81800766);2018年安徽省重点研究与开发计划项目(1804h08020241);安徽省自然科学基金(1708085MH188);活性生物大分子研究安徽省重点实验室自主研究课题(LAB201808);安徽省高等学校人文社会科学研究项目(SK2019A0214);皖南医学院校级重点科研基金项目(WK2020Z02);皖医弋矶山医院“高峰”培育计划(GF2019J07);皖医弋矶山医院“攀峰”培育计划(PF2019013)。

年　　份：2021

卷　　号：41

期　　号：8

起止页码：1207-1213

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CSCD、CSCD2021_2022、核心刊

摘　　要：目的研究溶酶体膜蛋白Sidt2缺失后对肝脏自噬的影响。方法利用Crispr-Cas9技术构建Sidt2敲除的人肝脏(HL7702)细胞模型,对自噬关键蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12进行蛋白水平检测,同时使用免疫荧光方法对LC3B及P62进行共定位,检测自噬小体对P62货物蛋白的识别与封存以及自噬溶酶体的降解。对LC3B及LAMP1进行免疫荧光共定位,检测自噬小体与溶酶体融合过程。使用LysoTracker对酸性溶酶体进行示踪。结果成功构建HL7702细胞Sidt2^(+/+)组及Sidt2^(-/-)组,HL7702细胞Sidt2^(-/-)组较Sidt2^(+/+)组相比,自噬关键蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ及P62表达均增多(P<0.01),免疫荧光结果显示LC3B及P62亦明显增多(P<0.001),同时自噬相关蛋白Atg5、Atg7、Atg12表达减少(P<0.05)。LC3B与P62共定位降低,LC3B与LAMP1共定位降低,酸性溶酶体数量减少(P<0.05)。结论Sidt2基因的缺失导致人肝脏细胞自噬小体对P62货物蛋白的识别和封存障碍,同时酸性溶酶体数量减少、自噬小体与溶酶体融合障碍导致自噬溶酶体途径受阻,最终导致LC3B与P62发生堆积,肝脏细胞自噬受损。

关 键 词：Sidt2  自噬小体  溶酶体 融合  货物蛋白  

分 类 号：R575]