文献类型：期刊文章

作　　者：于璇[1] 王卫芳[1] 李献锋[1] 冯黎霞[1] 乾义柯[2] 张承军[3] 魏霜[1]

Yu Xuan;Wang Weifang;Li Xianfeng;Feng Lixia;Qian Yike;Zhang Chengjun;Wei Shuang(Guangzhou Customs District Technology Center,Guangzhou 510623,China;Jianghan University;Huangdao Customs House)

机构地区：[1]广州海关技术中心 [2]江汉大学 [3]黄岛海关

出　　处：《植物检疫》

基　　金：国家重点研发计划(2018YFC0809200);海关总署科研项目(2020HK147);广州海关科研项目(2020GZCK-004)。

年　　份：2021

卷　　号：35

期　　号：4

起止页码：49-54

语　　种：中文

收录情况：CAB、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：利用叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)与实时荧光PCR技术相结合(PMA-qPCR),对PMA质量浓度、暗孵育和曝光时间等因素进行优化,建立了检测十字花科黑斑病菌活菌的方法。结果显示,当PMA质量浓度为10μg/mL,避光条件下孵育5 min、然后曝光10 min,此条件下能够抑制10-7CFU/mL十字花科黑斑病菌死菌的DNA扩增,对活菌扩增无影响,通过对比qPCR和PMA-qPCR的灵敏度可知,两者灵敏度差异不大,最低检出限均为10-3CFU/mL,将PMA-qPCR方法用于实际5批十字花科黑斑病菌阳性的油菜籽样品检测,结果显示该方法能准确反映实际样品的带活菌的情况。本研究为十字花科黑斑病菌活菌的检测提供了快速检测方法,可为实验室该病菌的快速筛检提供参考。

关 键 词：十字花科黑斑病菌  PMA-qPCR  活菌 检测  

分 类 号：S41-31]