文献类型：期刊文章

作　　者：周大旺[1,3] 张晨禹[2,3] 黎博[1] 张强[1,3] 刘聪[1,3] 詹浩洪[2,3] 胡春林[2,3] 廖晓星[1,4]

ZHOU Da-wang;ZHANG Chen-yu;LI Bo;ZHANG Qiang;LIU Cong;ZHAN Hao-hong;HU Chun-lin;LIAO Xiao-xing(The Emergency and Disaster Medical Center,The Seventh Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Shenzhen 518107,China;Department of Emergency,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;Department of Assisted Circulation Laboratory,The First Affiliated Hospital,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080,China;Research Institute of Sun Yat-sen University in Shenzhen,Shenzhen 518057,China)

机构地区：[1]中山大学附属第七医院急诊与灾难医学中心,广东深圳518107 [2]中山大学附属第一医院急诊科,广东广州510080 [3]中山大学附属第一医院卫生部辅助循环重点实验室,广东广州510080 [4]中山大学深圳研究院,广东深圳518057

出　　处：《中国病理生理杂志》

基　　金：广东省基础与应用基础研究基金项目(No.2020A1515010120);深圳市科技计划项目(No.JCYJ20160608142215491)。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：7

起止页码：1178-1186

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:观察外源性导入转录因子EB(TFEB)对缺血性脑卒中小鼠神经功能损伤的影响。方法:(1)15只10周龄雄性C57BL/6小鼠用于建立永久性大脑中动脉阻塞(pMCAO)模型,随机分为假手术组、梗阻2 h组、梗阻4 h组、梗阻8 h组和梗阻24 h组,每组3只,Western blot法检测pMCAO后皮层神经元TFEB、溶酶体相关膜蛋白1(LAMP-1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)和cleaved caspase-3蛋白的表达;(2)45只8周龄雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、TFEB过表达组、过表达对照组、TFEB敲减组和敲减对照组,每组9只。除假手术组外,其余4组小鼠均经侧脑室注射9型腺相关病毒(AAV9),分别为AAV9-TFEB、AAV9-NC、AAV9-shTFEB和AAV9-shNC,注射2周后建立pMCAO模型,24 h后采用Longa评分法评估小鼠神经功能,磁共振法检测并计算脑梗死体积,TUNEL染色检测皮层神经元细胞凋亡情况,尼氏染色观察皮层神经元细胞形态及数量,Western blot法检测皮层神经元TFEB、LAMP-1、LC3B、cleaved caspase-3蛋白的表达。结果:与假手术组相比,pMCAO后2~24 h,皮层神经元TFEB、LAMP-1及LC3B-II蛋白表达水平均显著下降,而cleaved caspase-3表达升高(P<0.05)。侧脑室注射AAV9-TFEB可改善pMACO后小鼠Longa评分,而注射AAV9-shTFEB则恶化Longa评分(P<0.05)。磁共振结果显示侧脑室注射AAV9-TFEB可减少脑梗死体积,而注射AAV9-shTFEB则增加脑梗死体积(P<0.05)。尼氏染色显示AAV9-TFEB组小鼠皮层神经元细胞数量显著多于AAV9-NC组,AAV9-shTFEB组小鼠皮层神经元细胞数量则显著少于AAV9-shNC组(P<0.05)。Western blot结果显示过表达TFEB可增加皮层脑组织LAMP-1和LC3B-II表达,降低cleaved caspase-3表达(P<0.05);敲减TFEB则降低皮层脑组织LAMP-1和LC3B-II表达,增加cleaved caspase-3表达(P<0.05)。结论:利用AAV9外源性导入TFEB可通过激活自噬及溶酶体功能而减少pMCAO后皮层神经元细胞凋亡,改善小鼠神经功能。

关 键 词：脑缺血性卒中 转录因子EB  自噬 细胞凋亡  溶酶体

分 类 号：R743.3] R363.2[临床医学类]