文献类型：期刊文章

作　　者：白帆[1,2] 吴金迪[3] 王晓晖[1] 吕天星[1] 王艳芳[1] 郝永清[1]

BAI-Fan;WU Jin-di;WANG Xiao-hui;LYU Tian-xing;WANG Yan-fang;HAO Yong-qing(Laboratory of Microbiology and Immunology,College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,No.306,Zhaowuda Road,Saihan District,Hohhot 010018,China;Veterinary Research Institute,Inner Mongolia Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences,No.22 Zhaojun Road,Yuquan District,Hohhot 010031,China;Laboratory of Veterinary Pharmacology,and Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Techniques for Animal Disease,Ministry of Agriculture,College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,No.306,Zhaowuda Road,Saihan District,Hohhot 010018,China)

机构地区：[1]内蒙古农业大学兽医学院微生物学与免疫学实验室,内蒙古呼和浩特010018 [2]内蒙古自治区农牧业科学院兽医研究所,内蒙古呼和浩特010031 [3]内蒙古农业大学兽医学院/农业部兽医药理学实验室/动物疫病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018

出　　处：《中国预防兽医学报》

基　　金：内蒙古农业大学科技成果转化专项资金(YZGC2017027);内蒙古自治区科技计划项目(201802066)。

年　　份：2021

卷　　号：43

期　　号：4

起止页码：411-417

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为验证绵羊肺炎支原体(M. ovi)或脂质相关膜蛋白(LAMPs)是否通过Toll样受体2(TLR2)诱导小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α的表达,本研究利用不同浓度的M.ovi或LAMPs刺激C57BL/6J WT小鼠及Tlr2-/-基因缺失小鼠的腹腔巨噬细胞12 h后,利用荧光定量PCR(qPCR)检测Tlr2和TNF-α基因的转录水平。结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞中Tlr2和TNF-α基因的转录水平均不同程度上升,而Tlr2-/-基因缺失小鼠巨噬细胞TNF-α基因的转录水平明显受到抑制。进一步以终浓度为1×10^(7)cfu/mL M.ovi或8μg/mL LAMPs分别刺激C57BL/6J WT小鼠和Tlr2-/-基因缺失小鼠的巨噬细胞,不同时间后利用qPCR检测Tlr2和TNF-α基因的转录水平;利用流式细胞术检测C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞中TLR2蛋白的表达水平;采用ELISA方法检测两种小鼠巨噬细胞上清液中TNF-α的分泌水平;利用western blot检测细胞中MAPK信号通路的激活。qPCR结果显示,以M. ovi或LAMPs经不同时间刺激的C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞中Tlr2和TNF-α基因的转录水平均不同程度上升,而Tlr2-/-基因缺失小鼠巨噬细胞中TNF-α基因的转录水平均明显受到抑制;流式细胞术检测结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞在受到M. ovi或LAMPs刺激后,TLR2蛋白的表达水平均不同程度上升;ELISA结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞在受到M. ovi或LAMPs刺激后,TNF-α蛋白的表达水平均不同程度上升,而Tlr2-/-基因缺失小鼠巨噬细胞中TLR2蛋白的表达则明显受到抑制;Western blot结果显示,C57BL/6J WT小鼠巨噬细胞经M. ovi或LAMPs刺激后MAPK信号通路中各信号蛋白(Erk、p38、JNK)均发生磷酸化反应,而Tlr2-/-基因缺失小鼠巨噬细胞在受到这两种物质刺激后MAPK信号通路明显受到抑制。上述结果表明,M. ovi及其LAMPs可通过小鼠腹腔巨噬细胞的TLR2激活MAPK信号通路,继而引起细胞因子TNF-α的分泌增多。本研究首次证实M. ovi及其LAMPs是通过TLR2及MAPK信号通路引起小鼠腹

关 键 词：绵羊肺炎支原体 脂质相关膜蛋白 TOLL样受体2 TNF-Α

分 类 号：S855.1]