文献类型：期刊文章

作　　者：黄月明[1] 牟颖[2] 周骏[1] 毕瑩[1] 张智琪[1] 陈星湘[1] 吴青青[3]

HUANG Yue-ming;MU Ying;ZHOU Jun;BI Ying;ZHANG Zhi-qi;CHEN Xing-xiang;WU Qing-qing(Department of Microbiology and Immunology,School of Clinical Laboratory,Guizhou Medical University,Guiyang 550004,China;Research Center for Analytical Instrumentation,Institute of Cyber-Systems and Control,State Key Laboratory of Industrial Control Technology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China;Clinical Laboratory Center,Affiliated Hospital of Guizhou Medical University,Guiyang 550004,China)

机构地区：[1]贵州医科大学医学检验学院临床微生物与免疫学教研室,贵州贵阳550004 [2]浙江大学工业控制技术国家重点实验室,智能系统与控制研究所,分析仪器研究中心 [3]贵州医科大学附属医院临床检验中心

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31460236)。

年　　份：2021

卷　　号：16

期　　号：6

起止页码：624-629

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CSCD、CSCD2021_2022、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的将环介导等温扩增技术(LAMP)与横向流动试纸条(LFD)联合应用,建立一种快速、可视化的HPV16、HPV58检测方法。方法运用LAMP在线引物设计软件,针对HPV16E6基因及HPV58L1基因保守区域设计引物及探针。采用生物素标记LF,荧光基团FAM和淬灭基团BHQ-1标记探针,LFD进行目视检测,建立HPV16和HPV58的LAMP-LFD检测方法,并对其特异性、灵敏度及临床实用性进行验证。将临床样品使用该方法的检测结果与实时LAMP扩增及qPCR结果相比较,计算符合率。结果优化的LAMP最佳反应温度为63℃,最佳反应时间为50min。LFD检测仅需5min,故完成检测耗时仅55min;建立的LAMP-LFD方法能特异性检出HPV16、HPV58,其他5种常见高危型HPV呈阴性反应;该方法针对HPV16和HPV58的检测灵敏度均为100拷贝/μl,50份临床样品检测结果与实时LAMP和qPCR检测的符合率达100%。结论建立的HPV16、HPV58LAMP-LFD检测体系快速、简便,可视化。该方法对设备的要求低,仅需恒温孵育器即可完成,结果易观察,适用于现场HPV检测,以及经济落后和资源匮乏地区的HPV筛查。

关 键 词：横向流动试纸条  环介导等温扩增技术 人乳头瘤病毒 快速检测  

分 类 号：R392-33]