文献类型：期刊文章

作　　者：邱招辉[1] 张贺平[1] 李健玲[2] 王华东[1] 陆大祥[1] 戚仁斌[1]

QIU Zhao-hui;ZHANG He-ping;LI Jian-ling;WANG Hua-dong;LU Da-xiang;QI Ren-bin(Department of Pathophysiology&Key Laboratory of State Administration of Traditional Chinese Medicine,College of Ba-sic Medicine,Jinan University,Guangzhou 510632,China;Department of Anesthesiology,The First Affiliated Hospital,Jinan University,Guangzhou 510632,China)

机构地区：[1]暨南大学基础医学院病理生理学系,国家中医药管理局病理生理重点实验室,广东广州510632 [2]暨南大学附属第一医院麻醉科,广东广州510632

出　　处：《中国病理生理杂志》

基　　金：广东省自然科学基金资助项目(No.2014A030313394)。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：988-997

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨远志皂苷元(Sen)对缺氧/复氧(H/R)损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞模型中铁死亡的影响及可能的机制。方法:培养高分化PC12细胞,构建H/R损伤细胞模型和erastin诱导铁死亡细胞模型。采用MTT法检测细胞活力;显微镜下观察细胞形态变化,微管相关蛋白2(MAP-2)荧光染色观察神经元突触的变化;检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)及细胞内亚铁离子(Fe2+)、总谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;荧光探针DCFH-DA标记检测活性氧簇(ROS)水平;JC-1染色观察线粒体膜电位(ΔΨm)的变化;Western blot检测铁死亡相关蛋白(ACSL4、GPX4和SLC7A11)的表达。结果:确定H/R造模时间为缺氧12 h,复氧2 h,细胞活力降低约50%(P<0.05);铁死亡造模条件为10µmol/L铁死亡诱导剂erastin作用14 h,细胞活力降低约50%(P<0.05)。不同浓度Sen或铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)作用14 h后,细胞活力无显著变化(P>0.05)。Sen或Fer-1干预后,与模型组相比,细胞活力显著升高(P<0.05)。与对照组相比,H/R和erastin组细胞显著变小变圆,突触变短(P<0.05),细胞上清液LDH水平及细胞内Fe2+和ROS水平显著升高(P<0.05),细胞内GSH水平、GSH-Px活性和ΔΨm水平显著降低(P<0.05)。Sen或Fer-1干预后,与模型组相比,细胞形态接近正常,突触显著变长(P<0.05),细胞上清液LDH水平及细胞内Fe2+和ROS水平显著降低(P<0.05),细胞内GSH水平、GSH-Px活性和ΔΨm水平显著升高(P<0.05)。与对照组相比,H/R组和erastin组ACSL4蛋白表达显著升高,GPX4和SLC7A11蛋白表达显著降低(P<0.05);Sen或Fer-1干预后,与模型组相比,ACSL4蛋白表达显著降低,GPX4和SLC7A11蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:H/R损伤PC12细胞模型中存在铁死亡,且Sen能抑制铁死亡,发挥保护细胞的作用,其机制可能与Sen提高细胞清除氧自由基能力、降低细胞内Fe2+水平和上调GPX4蛋白表达等有关。

关 键 词：缺氧/复氧损伤  铁死亡  远志皂苷元 PC12细胞 活性氧簇

分 类 号：R743] R363.2[临床医学类]