文献类型：期刊文章

作　　者：汪棋[1] 庞静[1] 蔡玉[1] 王锋[1] 张艳丽[1]

WANG Qi;PANG Jing;CAI Yu;WANG Feng;ZHANG Yan-Li(College of Animal Science and Technology/Jiangsu Livestock Embryo Engineering Laboratory,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)

机构地区：[1]南京农业大学动物科技学院/江苏省家畜胚胎工程实验室,南京210095

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金(31872359);江苏省肉羊产业技术体系建设专项(JATS[2020]427)。

年　　份：2021

卷　　号：29

期　　号：4

起止页码：631-640

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：雄性动物的繁殖能力受营养和能量代谢的影响,而AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)作为能量的感受器分子,在其生殖功能中起着重要作用,本实验旨在研究AMPK对饥饿诱导的绵羊(Ovis aries)睾丸间质细胞(leydig cells,LCs)自噬和凋亡的作用。采用绵羊LCs为实验材料,培养至第4代,分别用无血清培养液培养0、3、6、12、24 h后,利用Cell Counting Kit-8(CCK8)试剂盒检测细胞活力,筛选合适的处理时间。饥饿12 h,通过透射电镜和流式细胞术观察LCs的自噬和凋亡,qRTPCR和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)方法分别检测自噬及凋亡相关的基因和蛋白表达变化。结果表明,与对照组相比,饥饿诱导的LCs中自噬体增多,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),并且自噬相关基因程序性死亡受体-1(programmed cell death-1,Beclin1)和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)等基因表达量显著升高(P<0.05),Beclin1蛋白表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比率显著升高(P<0.05),促凋亡相关基因Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,BAX)等基因表达显著升高(P<0.05),抗凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)基因表达极显著降低(P<0.01),BAX/Bcl-2蛋白表达比率升高;AMP依赖的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素蛋白激酶(mammalian target of rapamycin,mTOR)/UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK1)通路的关键基因的表达均极显著上升(P<0.01)。综上,饥饿诱导绵羊LCs,能够激活AMPK/mTOR/ULK1通路并促进细胞自噬和凋亡的发生。本研究可为进一步探究AMPK对睾丸发育的影响提供理论参考。

关 键 词：饥饿  绵羊睾丸间质细胞  细胞自噬 细胞凋亡  AMPK/mTOR/ULK1通路  

分 类 号：S8]