文献类型：期刊文章

作　　者：惠文巧[1] 汤继顺[1] 章薇[1] 班谦[2] 朱德建[1] 陈胜[1]

HUI Wenqiao;TANG Jishun;ZHANG Wei;BAN Qian;ZHU Dejian;CHEN Sheng(Anhui Province Key Laboratory of Livestock and Poultry Product Safety Engineering,Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Anhui Academy of Agriculture Sciences,Hefei 230031,China;Center for Stem Cell and Translational Medicine,School of Life Sciences,Anhui University,Hefei 230601,China)

机构地区：[1]安徽省农业科学院畜牧兽医研究所,畜禽产品安全工程安徽省重点实验室,合肥230031 [2]安徽大学生命科学学院,干细胞及转化医学研究中心,合肥230031

出　　处：《中国草食动物科学》

基　　金：国家自然科学基金项目(31402048);安徽省重点研究和开发计划(1804a07020115,1804e03020322,202004a06020043);安徽省农业科学院创新团队项目(2020YL033)。

年　　份：2021

卷　　号：41

期　　号：3

起止页码：26-30

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、普通刊

摘　　要：TLR4是天然免疫系统中的一种重要模式识别受体,可选择性地识别病原微生物而启动天然免疫,在宿主天然免疫和获得性免疫中具有重要作用。山羊TLR4基因与多种疾病相关,然而,目前在山羊上关于TLR4基因敲除及相关功能的研究尚未见报道。采用CRISPR/cas9系统,首先设计TLR4基因的sgRNA片段,合成sgRNA核苷酸序列,构建同时表达sgRNA和Cas9 D10A的质粒PYSY-sgRNA,连接并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,最后对转化子进行验证,提取质粒并转染山羊成纤维细胞,通过测序进行敲除检测。结果表明:酶切和测序鉴定证明TLR4基因敲除载体构建正确。说明采用CRISPR/Cas9构建的载体,可为后续研究TLR4在支原体肺炎感染的免疫应答分子机制提供理论依据。

关 键 词：CRISPR/Cas9  山羊 TOLL样受体4 基因敲除

分 类 号：S827.2]