文献类型：期刊文章

作　　者：杨宏新[1,2] 杨勇[3] 曹贵方[1]

YANG Hongxin;YANG Yong;CAO Guifang(Key Laboratory of Basic Veterinary Medicine of Inner Mongolia Autonomous Region,College of Veterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018;Department of Cell Biology,College of Basic Medicine,Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010110;Department of Oncology Surgery,Inner Mongolia Peopled Hospital,Hohhot 010017,China)

机构地区：[1]内蒙古农业大学兽医学院内蒙古自治区基础兽医学重点实验室,内蒙古呼和浩特010018 [2]内蒙古医科大学基础医学院细胞生物学教研室,内蒙古呼和浩特010110 [3]内蒙古自治区人民医院肿瘤外科,内蒙古呼和浩特010017

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81960772);内蒙古自然科学基金(2017MS0840);内蒙古教育厅科研项目(NJZY17121);内蒙古自治区科技厅重点实验室项目(201602057)。

年　　份：2021

卷　　号：37

期　　号：4

起止页码：362-367

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的制备兔抗人精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)多克隆抗体。方法构建pET-22b-SAS1B-His质粒,转化E.coli.BL21(DE3)细胞,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导SAS1B重组蛋白表达。用层析纯化后的蛋白免疫日本大耳白兔制备SAS1B多克隆抗体。ELISA检测SAS1B抗体效价,Western blot和免疫组织化学法鉴定SAS1B抗体特异性。结果在构建pET-22b-SAS1B-His原核表达载体的基础上,在BL21(DE3)细胞成功诱导表达SAS1B重组蛋白。制备的兔抗人SAS1B多克隆抗体效价为1∶51200。SAS1B多克隆抗体能与SAS1B重组蛋白特异结合且能识别乳腺癌组织中的SAS1B蛋白。结论成功制备具有较好特异性的兔抗人SAS1B多克隆抗体。

关 键 词：精子顶体精子溶菌酶样蛋白1结合蛋白(SAS1B)  原核表达  蛋白纯化  多克隆抗体

分 类 号：R392.1] Q785[基础医学类]