文献类型：期刊文章

作　　者：巫秀红[1] 刘庆斌[2] 张永红[1] 郭俊林[2] 张玮[2] 崔德凤[1]

WU Xiuhong;LIU Qingbin;ZHANG Yonghong;GUO Junlin;ZHANG Wei;CUI Defeng(llege of Animal Science and Technology/Beijing Key Laboratory of Traditional Chinese Veterinary Medicine,Beijing University of Agriculture;Beijing Animal Disease Control Center)

机构地区：[1]北京农学院动物科学技术学院/兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京102206 [2]北京市动物疫病预防控制中心,北京102609

出　　处：《北京农学院学报》

基　　金：2020年常规与重大动物疫病临床诊断项目(20200211010349);北京市生猪产业创新团队项目(BAIC02)。

年　　份：2021

卷　　号：36

期　　号：3

起止页码：78-82

语　　种：中文

收录情况：ZGKJHX、普通刊

摘　　要：[目的]根据DNA序列数据库上已公布的布鲁氏菌外膜蛋白(outer membrane protein,Omp)Omp 25基因,设计一对引物和荧光探针,通过反应体系优化,建立一种布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法。[方法]以构建的外膜蛋白目的片段重组质粒为标准品,验证该方法的灵敏度、特异性,通过优化反应条件,建立标准曲线。通过对34份已知临床背景的样品检测,验证该方法的敏感性。[结果]建立的布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法,特异性验证符合率100%,最低检测限约为100 copies/μL,敏感度的检出率为100%,建立标准曲线的R2为0.994,扩增效率99.73%。[结论]建立的布鲁氏菌荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于布鲁氏菌的检测。

关 键 词：布鲁氏菌 外膜蛋白Omp 25  荧光定量PCR

分 类 号：S852]