文献类型：期刊文章

作　　者：肖蓉[1,2] 王兴红[1,2] 李雄伟[1,2] 刘惠惠[1,2] 鲁盛平[1,2] 侯有明[1,2] 石章红[1,2]

XIAO Rong;WANG Xing-Hong;LI Xiong-Wei;LIU Hui-Hui;LU Sheng-Ping;HOU You-Ming;SHI Zhang-Hong(State Key Laboratory of Ecological Pest Control for Fujian and Taiwan Crops,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;Fujian Provincial Key Laboratory of Insect Ecology,College of Plant Protection,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China)

机构地区：[1]福建农林大学,闽台作物有害生物防控国家重点实验室,福州350002 [2]福建农林大学植物保护学院,福建省昆虫生态学重点实验室,福州350002

出　　处：《昆虫学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(31470656);国家重点研发计划(2017YFC1200605);福建省自然科学基金项目(2018J01705);福建省高校新世纪人才计划项目(KLa16058A)。

年　　份：2021

卷　　号：64

期　　号：3

起止页码：348-362

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】明确入侵害虫红棕象甲Rhynchophorus ferrugineus胞质型肽聚糖识别蛋白RfPGRP-L2在肠道菌群稳态的维持和调控过程中的作用,将为靶向破坏肠道菌群稳态的害虫控制新策略研发提供新的科学依据和作用靶标。【方法】利用生物信息学方法分析RfPGRP-L2的序列特征。利用RT-qPCR分析RfPGRP-L2在健康红棕象甲4龄幼虫不同组织(头、脂肪体、表皮、前肠、中-后肠、血淋巴)以及大肠杆菌Escherichia coli DH5α和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus经注射(注射1μL OD 600=1.6的菌液)和喂食(取食涂抹1 mL OD 600=1.6的菌液的甘蔗薄片)两种不同方式分别感染后红棕象甲4龄幼虫肠道和脂肪体中的表达量;进行RfPGRP-L2原核表达,利用体外孵育方法检测重组蛋白RfPGRP-L2对大肠杆菌DH5α和金黄色葡萄球菌的凝集和抑菌活性;RNAi干扰RfPGRP-L2后,检测红棕象甲4龄幼虫血淋巴和肠道中大肠杆菌菌落数的变化;利用RT-qPCR分析RNAi干扰RfPGRP-L2后红棕象甲4龄幼虫脂肪体和肠道中抗菌肽基因表达量的变化;利用基于细菌16S rRNA的高通量测序分析RNAi干扰RfPGRP-L2对健康红棕象甲4龄幼虫肠道菌群结构组成的影响。【结果】SMART预测发现红棕象甲RfPGRP-L2基因编码的蛋白中无跨膜结构域也无信号肽,这表明RfPGRP-L2是一种胞质型肽聚糖识别蛋白。RT-qPCR检测发现,RfPGRP-L2主要在健康红棕象甲4龄幼虫血淋巴、肠道和脂肪体等免疫组织中表达;被注射感染大肠杆菌和金黄色葡萄球菌6 h和12 h后,红棕象甲4龄幼虫脂肪体中RfPGRP-L2的表达量分别显著上调;被喂食感染大肠杆菌6 h后,红棕象甲4龄幼虫肠道中RfPGRP-L2的表达量显著增加。重组表达蛋白RfPGRP-L2能引起大肠杆菌和金黄色葡萄球菌发生凝集反应,这说明RfPGRP-L2能够识别这两种细菌。当RfPGRP-L2被干扰后,红棕象甲4龄幼虫对肠道和血淋巴中感染EGFP标记的大肠杆菌的清除能力显著

关 键 词：红棕象甲 肽聚糖识别蛋白 表达谱 肠道菌群 免疫反应  免疫稳态

分 类 号：S433.5]