期刊文章详细信息
农杆菌介导小球藻快速转化方法的建立与条件优化
Establishment and conditions optimization of Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation in Chlorella pyrenoidosa
文献类型:期刊文章
GUO Juanjuan;LI Jianghong;LONG Tingting;MO Yi;YU Jingze;ZHANG Peng;LI Yonghao(College of Oceanology and Food Sciences,Quanzhou Normal University,Quanzhou 362000,China;Chongqing Key Laboratory of Industrial Fermentation Microorganism,Chongqing University of Science and Technology,Chongqing 401331,China;Fujian Province Key Laboratory for the Development of Bioactive Material from Marine Algae,Quanzhou 362000,China)
机构地区:[1]泉州师范学院海洋与食品学院,福建泉州362000 [2]重庆科技学院工业发酵微生物重庆市重点实验室,重庆401331 [3]福建省海洋藻类活性物质制备与功能开发重点实验室,福建泉州362000
基 金:国家自然科学基金青年基金项目(21808022);福建省中青年教师教育科研项目(JAT190521);福建省自然科学基金(2020J05159);重庆市教委科学技术研究项目(KJQN201901523);福建省海洋藻类活性物质制备与功能开发重点实验室开放课题(2018FZSK05)。
年 份:2021
卷 号:40
期 号:4
起止页码:56-60
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、IC、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊
摘 要:基于根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的方法实现异养蛋白核小球藻快速遗传转化,并优化转化条件。结果表明,小球藻异养生长条件的碳氮组合配比为葡萄糖20 g/L和酵母粉2 g/L时,生长速率为自养的3~5倍;根瘤农杆菌GV3101和LBA4404均可成功实现对异养小球藻的遗传转化,且转化效率无显著性差异(P>0.05)。最优转化条件为根瘤农杆菌GV3101初始OD600 nm值=0.8,小球藻(Chlorella pyrenoidosa)浓度为107个/mL,各取100μL混合涂布在pH=5.4、乙酰丁香酮浓度为200μmol/L的CM平板上,24℃避光培养40 h后转到筛选平板,仅2 d转化子便清晰可见,数目达88个/106微藻。转化过程整体耗时仅5 d,普遍比自养微藻转化时间缩短3倍以上,为小球藻代谢工程改造提供技术手段,同时为其他可异养培养微藻的短时高效遗传转化提供科学依据。
关 键 词:蛋白核小球藻 根瘤农杆菌 遗传转化
分 类 号:Q933]
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