文献类型：期刊文章

作　　者：王彤彤[1,2,3] 叶鑫[1,3] 边维[1,3] 陈治池[1,3] 杜娟娟[1,4] 傅维达[5] 陈梦娇[5] 李俊楠[5] 孙臣友[1,3]

WANG Tong-tong;YE Xin;BIAN Wei;CHEN Zhi-chi;DU Juan-juan;FU Wei-da;CHEN Meng-jiao;LI Jun-nan;SUN Chen-you(Department of Anatomy,School of Basic Medical Sciences of Wenzhou Medical University,Zhejiang Wenzhou 325035,China;Department of Nursing,School of Medicine and Pharmaceutical Engineering of Taizhou Vocational and Technical College,Zhejiang Taizhou 318000,China;Institution of Neuroscience,School of Basic Medical Sciences of Wenzhou Medical University,Zhejiang Wenzhou 325035,China;Department of Histology And Embryology,School of Basic Medical Sciences of Wenzhou Medical University,Zhejiang Wenzhou 325035,China;Bachelor of Clinical Medicine and Medical Imaging,Grade 2015,2016,the First Clinical Medical College,Wenzhou Medical University,Zhejiang Wenzhou 325035,China)

机构地区：[1]温州医科大学基础医学院人体解剖学教研室,浙江温州325035 [2]台州职业技术学院医学与制药工程学院护理教研室,浙江台州318000 [3]温州医科大学基础医学院神经科学研究所,浙江温州325035 [4]温州医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室,浙江温州325035 [5]温州医科大学第一临床医学院、医学影像学本科,浙江温州325035

出　　处：《解剖学报》

基　　金：国家自然科学基金(81671401);浙江省医药卫生科学研究计划项目(2016KYA133);温州市基础性科研项目(Y20190059)。

年　　份：2021

卷　　号：52

期　　号：1

起止页码：5-13

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的明确别孕烯醇酮(APα)对6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤的SH-SY5Y细胞系的保护作用,并阐明可能的分子机制。方法向体外培养的SH-SY5Y细胞系中分别加入6-OHDA、APα、γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)拮抗剂荷包牡丹碱(Bic)和电压门控L型Ca^(2+)通道拮抗剂硝苯地平(nifedipine),采用免疫荧光细胞化学染色方法观察不同组别酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的变化,Western blotting检测胞质钙调蛋白(CaM)、钙离子-钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱδ3(Ca MKⅡδ3),胞核Ca MKⅡδ3、脑源性神经营养因子(BDNF)和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK1)表达的变化,采用蛋白质免疫共沉淀验证Ca MKⅡδ3与CDK1/BDNF的相互作用。结果APα作用后,6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞TH和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞数目均明显增加,而TH/Brd U双阳性细胞数目无显著变化;同时Western blotting结果表明,SH-SY5Y细胞胞质和胞核上述蛋白的表达与单纯6-OHDA组相比也明显上升,经Bic处理后各蛋白增加更为明显。免疫共沉淀结果表明,Ca MKⅡδ3与CDK1/BDNF存在相互作用。结论APα对6-OHDA损伤的SH-SY5Y细胞的保护中,GABAAR发挥负性调控作用,通过稳定细胞的内环境达到增加TH阳性神经元数量的目的,其中Ca^(2+)-Ca M-CaMKⅡδ3信号通路和BDNF与CDK1发挥了关键作用。

关 键 词：别孕烯醇酮  Γ-氨基丁酸A受体 多巴胺能神经元 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ  脑源性神经营养因子 免疫印迹法

分 类 号：Q189]