文献类型：期刊文章

作　　者：苏丛[1] 伍婷[2] 徐方明[2] 陈昊然[3] 刘艳艳[2,3,4] 律娜[2] 兰燕虎[3,4] 李家斌[1,2,3,4]

Su Cong;Wu Ting;Xu Fangming(Dept of Infectious Diseases,The Chaohu Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Chaohu 238000;Dept of Infectious Diseases,The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University,Hefei 230022)

机构地区：[1]安徽医科大学附属巢湖医院感染病科,巢湖238000 [2]安徽医科大学第一附属医院感染病科,合肥230022 [3]安徽省细菌耐药性监控中心,合肥230022 [4]安徽医科大学细菌耐药研究所,合肥230022

出　　处：《安徽医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(编号:81673242、81973983);2018年度安徽高校自然科学研究项目(编号:KJ2018A0193);2018安徽省高校优秀拔尖人才培育(编号:gxyq2018010)。

年　　份：2021

卷　　号：56

期　　号：4

起止页码：505-509

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的通过建立Lamtor2巨噬细胞条件敲除小鼠感染肺炎克雷伯菌(Kp)模型,初步研究Lamtor2基因生物学功能及其在Kp感染过程中的相关机制。方法将引进的Lamtor2^(flox/+)小鼠自交,Lyz2-Cre小鼠与Lamtor2^(flox/+)进行杂交,获得基因型为Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(-/-)和Lamtor2^(flox/+)Lyz2-Cre^(+/-)的子代小鼠;将上述两种基因型子代小鼠进行杂交,得到对照组小鼠(Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(-/-))和Lamtor2条件性基因敲除小鼠(Lamtor2^(flox/floxLyz)2-Cre^(+/-))。提取小鼠脚趾基因组DNA,经聚合酶链式反应(PCR)扩增,通过琼脂糖凝胶电泳鉴定子代小鼠基因型并提取肺泡巨噬细胞,利用qRT-PCR和Western blot验证Lamtor2基因敲除效果。小鼠感染Kp,观察生存状况;体外采用RT-qPCR检测Kp感染肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和Cxcl1表达水平,两组间比较采用t检验;Western blot验证iNOS的表达水平。结果成功建立Lamtor2条件性基因敲除小鼠模型,子代存活且可育;与对照组小鼠比较,实验组小鼠在感染Kp后生存率降低;Lamtor2^(flox/flox)Lyz2-Cre^(+/-)小鼠来源的肺泡巨噬细胞中的TNF-α(t=17.54,P=0.0032)、IL-1β(t=15.37,P=0.0042)和Cxcl1(t=37.82,P=0.0007)表达水平降低,且iNOS表达下降。结论构建了Lamtor2条件性基因敲除小鼠,感染肺炎克雷伯菌后,小鼠的生存率下降;肺泡巨噬细胞iNOS表达降低。

关 键 词：Lamtor2  条件性基因敲除  繁育  肺炎克雷伯菌

分 类 号：R332]