文献类型：期刊文章

作　　者：荣娜[1] 简思杰[1] 孙薇[1] 康超[1] 陈琛[1] 刘祥[1]

RONG Na;JIAN Sijie;SUN Wei;KANG Chao;CHEN Chen;LIU Xiang(Chinese-German Joint Institute for Naturel Product Research,College of Biological Sciences and Engineering,Shaanxi University of Technology,Hanzhong 723001,China)

机构地区：[1]陕西理工大学生物科学与工程学院中德天然产物研究所,陕西汉中723001

出　　处：《河南农业科学》

基　　金：国家外国专家局项目(GDT20186100426);陕西省科技厅重点研发计划项目(2020LSFP2-38);陕西理工大学人才项目(SLGQD1803)。

年　　份：2021

卷　　号：50

期　　号：3

起止页码：157-164

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：探究鱼类致病嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC的免疫原性与抗原性,评价其免疫学功能,以期为嗜水气单胞菌亚单位疫苗的开发提供理论依据。采用生物信息学方法预测TolC蛋白的理化性质,分析其菌属间同源性与进化关系,构建TolC蛋白表达菌株并确定其最佳诱导表达条件,包涵体洗涤和SDS-PAGE电泳切胶纯化TolC蛋白,免疫小鼠制备TolC抗血清,Western blot检测抗血清特异性与效价,免疫酶联法模拟TolC蛋白抗血清对不同鱼类致病菌的体外识别,探究TolC蛋白的抗原性。结果表明,TolC蛋白为孔道蛋白,在气单胞菌属间进化保守。成功表达、纯化了TolC蛋白,其最佳表达条件:菌液OD 600为1.0、IPTG浓度0.1 mmol/L、37℃诱导8 h。Western blot结果表明,制备获得特异性TolC抗血清,效价达到1∶3200;ELISA结果显示,TolC抗血清与嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、溶藻弧菌均存在识别作用。综上,嗜水气单胞菌外膜蛋白TolC具有较好的免疫原性和抗原性,并可能对不同鱼类致病菌存在交叉免疫保护作用。

关 键 词：嗜水气单胞菌 外膜蛋白TolC  原核表达 诱导条件  多克隆抗血清  抗原性

分 类 号：S852.4] Q71[动物医学类]